鸭肝炎病毒的分与检测.pdfVIP

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鸭肝炎病毒的分与检测

摘要 本实验通过鸭胚尿囊腔接种,对我国几个省市采集的12份死于疑似鸭病毒性肝炎的病鸭肝 组织进行病原分离,获得12个病毒分离株。这些分离株对10日龄鸭胚的致死率为100%,人工感 染6日龄雏鸭的致死率为O-100%不等。死亡鸭呈角弓反张姿势,剖检可见肝脏肿大,有出血点或 出血斑。将12株分离株经鸭胚传至第5代,收集鸭胚尿囊液毒测定这些毒株的EL‰为 101“/0.2ml~101 3/o.2ml不等。用鸡抗1型DHV及新型I)HV的血清和12株分离株进行中和试验, 结果表明:有7株为新型DHV,有2株为1型DHV,还有3株无法确定其血清型。 通过对新型弱毒株(B株)进行鸭胚传代致弱后,稀释成不同倍数对1日龄雏鸭进行免疫, 并于10日龄时用新型鸭肝炎强毒攻毒,观察雏鸭的死亡情况。由结果可知。&株在20倍稀释时, 保护率达100%,而稀释到100倍时则完全失去保护作用。同时对免疫的雏鸭采血,中和试验测定 血清的效价。免疫雏鸭在第10天时抗体水平达到高峰,然后呈逐渐下降趋势。结果表明。B株 经过鸭胚传代致弱后在毒力下降的同时仍保留一定的免疫原性,可以作为疫苗的候选株。 此外,本实验用鸭胚肝细胞(DEL)培养了新型鸭肝炎病毒,并详细观察了鸭肝炎病毒引起 的细胞病变,发现该病毒适于鸭胚肝细胞上培养。通过细胞免疫荧光染色,发现肝细胞本身自发 荧光,不适于免疫荧光检测:采用感染新型鸭肝炎强毒后死亡鸭的肾细胞做滴片进行荧光染色, 可检测到病毒抗原存在,为临床上快速诊断新型鸭病毒性肝炎提供一种检测方法。 关键词 中和试验, 免疫荧光试验, 新型鸭肝炎病毒 ABSTRACT Twelvevirusisolateswere obtained allantoicsag duck inoculationfrom embryo through duckling liver collectedfromseveral inChina.Allthese were samples ducklings provinces diagnosedclinically fromduckvirus was lethalrateoftheseisolates100 when dying hepatitis.The percentinoculating with duck these rate isolates,the 10-day·oldembryos.When mortatity inoculating6-day-oldducklings was o_一100%.Dead showedthe of swollenand among ducklings signopisthotonos.with punctuate with intheirlivers.Theofthesevirusstrainsde

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