双低菜粕中单宁植酸降解菌的筛选及固态发酵条件优化.pdfVIP

双低菜粕中单宁和植酸降解菌的筛选及固态发酵条件优化 摘要 本论文通过对土壤中的微生物进行分离筛选，获得了能够同时降解单宁和 植酸的菌株，研究这些菌株在固态发酵的条件下对菜粕中单宁和植酸的降解情 况，优化菌株的发酵条件，并对菌株的分类学地位进行鉴定。主要实验内容如下： 1、对土壤中微生物进行分离筛选获得可同时降解单宁和植酸的微生物。采用微 生物富集培养技术，经过分离纯化，共获得109个纯菌落(其中细菌39株、酵 母菌46株、霉菌24株)。分别用单宁和植酸筛选性培养基筛选分离到的109株 菌株和购自中国科学院微生物的9株菌，获得42株植酸降解菌(其中细菌13 株、酵母茵22株、霉菌7株)和18株单宁降解菌(其中细菌6株、酵母菌1株、 霉菌11株)，其中5株霉菌(M一6、M．3、M．1、3．951、3．316)和1株酵母菌 (2．120)共6株菌株可以同时分解单宁和植酸。 M．1、3．951、3．316和2．120)分别接种 2、将筛选得到的6株菌株(M．6、M一3、 到菜粕固态发酵培养基中，以相同处理不接菌种的菜粕培养基作为对照，同 时每个菌株设置不同发酵时间(1d、2d、4d和7d)，每个处理设置3个重复， 6．6～7．O)。检测不同菌株、不同 进行固态发酵(30℃，水分含量100％，pH 发酵时间发酵前后双低菜粕中单宁和植酸含量。结果表明，所用菌株均可以 在固态发酵的条件下显著降解双低菜粕中的单宁和植酸(PO．05)。综合考虑 发酵时间与发酵效果得到结论：最适发酵菌为M．6，最适发酵时间为1d。 3、为获得霉菌M．6降解双低菜粕单宁和植酸的最佳发酵条件，研究了起始发酵 萄糖)、氮源(尿素)、金属离子等营养因子在发酵过程中对M．6降解双低菜 6、 粕中的植酸和单宁能力的影响。结果表明，菌株M一6在起始温度25℃、pH 初始水分含量200％、加入葡萄糖、尿素和金属离子混合溶液，经24h发酵后， 对双低菜粕中的植酸和单宁具有最佳降解效果，可以使双低菜粕中的植酸含 量由2．81％下降至O．63％，单宁含量由1．32％下降至0．28％，显著低于对照组和 其他实验组(P0．05)。此外，在此发酵条件下，双低菜粕中粗蛋白含量由 37．16％提高至43．48％，粗蛋白的体外消化率由75．32％提高至79．15％。 4、通过菌落形态学、菌株切片和分子测序等方法，鉴定M．6为黑曲霉(么印g掣ZZ淞 对黑曲霉M．6产单宁酶和植酸酶活力的影响，结果表明在30℃时，M一6单宁酶 4．33士0．12U／Inl；在pH为5时，M．6单宁酶和植酸酶活性显著高于其他处理组 (PO．05)，分别为5．97土0．12U／m1和4．47士o．03U／m1。 关键词：双低菜粕；单宁；植酸；微生物降解：黑曲霉 IsolatiOnlSOIatiOnandana 0IoftannictannlCacidaClnandann acidaCln SCreenlngSCreening phyticpnynC and 0fconditions degradationmicr00rganismopnmization forsolidstatefermentationindouble-lowmeal rapeseed AbStract to alldscreell with Aseriesof wereconductedis01ate microo玛anism exp商ments