基因2型牛病毒腹泻病毒的分离、鉴定.pdf

中文摘要 1 BvDv_1和BvDv-2的检测与鉴别RT_PCR的方法建立 的基因序列，分别设计出针对BvDv．1、 NADL和BvDv_2 过参考株BVDv-l 检出BvDV_2阳性8份(44％)。 2 BVDV．2的分离与鉴定 3株病毒分离株能与鼠源抗BVDv_2 的有囊膜的病毒粒子；病毒感染细胞经差速离心、20％蔗糖垫底超速离心后，提纯的病毒经磷钨酸 负染，电镜观察到同样人小约60nm有囊膜的病毒颗粒。 3 BvDv-2野毒株的糖蛋白E2基因、非结构Ns2—3基因的克隆与序列分析 株的NS2．3基因同源性在89．7％～91．8％，推导氨基酸同源性91 近。 测与鉴定。 关键词：牛病毒性腹泻病毒2型，反转录一聚合酶链式反麻，分离鉴定，糖蛋白E2基因，非结构 蛋白NS2_3基因，5’非翻译区 Abstract 1．RrI二PCR to method髂tabljsheddetectaHd BVDv-landBVDv-2 djstinguish B硒ed0IItheGeIlBankdataofme5。岫仃anslated inⅡ1eGenBalllc Ie垂。船(5’UTR)l【110wfl fbm BVD、，fbrbothBVDv．1andBVDv．2 to isoJates，n们opa砥ofprimefs、他repu斛JydeSjgnedampljfy 5‘UTR f如m bomBVDV-l卸d spec讯callyfh掣nelnsonlyBVDV．1，oroIllyBVDV之，and BVDV-2， Basedt11eabove of tlle e解h spec墒cpfinle塔fbrr钾erse-缸锄scriptionchain respcctively pair polymemse straills di脑e11tiated，The 嘲cnon(R1：PCR)，ref确ceNADL(BⅦIV-1)柚d890(BⅦIV-2)werc diseasedtissue柚d bom clinical orgaf塔(spIeen，mesenterylyHlphnodc，hean，cannonmedu¨a，et．a1)f如m c弱esofc眦Ie inBvDv-2 detected infec6伽wercbyd坤RT-PCRes诅bljshedabove probabIy妯voIved resuⅡsshowedthat8 of we咒BVDv．2 llsjngⅡ他specmcprime培forBVDV-2，the 18(44％)samples infbcbon． rcla饽d 2．Isolationandidenti傲a廿I阻ofBVDV二2 T1leBVDV_2 of positivesampIesby盯PCR∞mtlⅡ优地面oIls inoculatedinto ce¨s 5～8 cho卵锄d theMDBKf研tlle、，ims Ancr b