ppri基因活转染对小鼠γ辐射损伤的作用及其机理研究.pdf

pprI基因活体转染对小鼠T辐射损伤的作用及其机理研究 中文摘要 中文摘要 目的：抗辐射球菌中的pprI基因是一个能够促进细菌体内re,cA、pprA等直接 参与DNA损伤修复基因表达的开关基因，在抗辐射球菌的极端抗性中起重要作用。 该基因对中子辐射损伤的防护作用已被证实。然而，该基因对哺乳动物丫射线急 性损伤的抗放作用及其机理迄今尚未见文献报道。本实验通过利用活体电转导技 术，将pCMV-HA-pprI质粒转入小鼠体内，来评价此基因对哺乳动物的丫射线的辐 射防护作用及其机制。 材料与方法：利用活体电转导仪，将pCMV-HA-pprI质粒转入小鼠的肌纤维 细胞，并对pprI质粒转染组与单纯照射组和空载体转染组分别用丫射线进行照射， 观察小鼠急性放射损伤的死亡率，血细胞数目和淋巴细胞百分比，肺脏、睾丸及 肾脏的组织病理学变化，应用流式细胞仪检测骨髓细胞、胸腺及脾脏淋巴细胞的 凋亡率，应用Western 物Rad51以及Rad52蛋白表达进行了检测，以探讨pprI基因对丫射线辐射损伤小 鼠的抗放作用及其机制。 结果：pCMV-HA．pprI质粒经活体电转导转入小鼠后2411，再用丫射线进行照 射。照后30天内，pprI质粒转染组死亡率为1／10，明显低于单纯照射组小鼠死亡 染组小鼠外周血白细胞总数在照后第7天为0．42109／L，显著高于单纯照射组小鼠 (Po．05)；血淋巴细胞百分率pprI基因转染组于照后35天恢复正常，明显快于 单纯照射组小鼠和pCMV-HA空载体转染组小鼠；由病理学检测可见，pprI基因对 丫射线辐射损伤小鼠的肺脏、睾丸、肾脏有明显的修复作用，肺组织水肿和纤维化 明显减轻，睾丸修复较快，以及提前进行肾脏的玻璃样变和水肿的修复；由细胞 凋亡检测可见，pprI基因转染组脾细胞凋亡率在第7、14、28天显著低于单纯照射 I 中文摘要pprl基因活体转染对小鼠T辐射损伤的作用及其机理研究 并且胸腺细胞和骨髓细胞凋亡率均于照后28天恢复正常；对小鼠体内VprI蛋白、 蛋白表达增高，尤其在照后第一天最为明显；Rad52蛋白表达无明显变化。 结论： 1．pprI基因活体电转染可降低Y射线致死剂量小鼠死亡率；显著减轻白细胞、红 细胞、血小板的下降程度，并使淋巴细胞恢复提前； 2．pprI基因活体电转染可显著减轻小鼠肺脏、睾丸、肾脏的病理反应，加快并 提前受损组织的修复。 3．pprI基因活体电转染显著降低小鼠骨髓细胞、胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡 率。 4．pprI基因活体电转染作用机理的研究表明，pprI原核基因成功地在哺乳动物 体内细胞表达，并作用于下游基因recA在哺乳动物细胞中的同源类似物fadSl基因， 1蛋白表达显著增高而发挥其抗放作用。 使RadS 5．本文研究结果提示，pprI基因活体电转染及其表达蛋白对急性放射损伤的防 治可能具有十分重要的应用和开发价值。 作 者：陈婷婷 指导老师：杨占山 Ⅱ ppr]基因活体转染对小鼠^r辐射损伤的作用及其机理研究 英文摘要 vivo EffectsandMechanismof transfer pprl by／n gene toEnhancetheRadioresistanceof Electroporation Mice Exposedto丫rays