slit2-rbo1通过tgfβ1-smad3信号通路促进小鼠纤维化的初步研究.pdf

促进小鼠肝纤维化的初步研究 博士研究生：常建兰 指导教师：丁彦青教授耿建国教授王丽京教授 摘要 研究背景 肝纤维化是指肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积所致的一种 常见病理变化。它不是一个独立的疾病，而是多种慢性肝脏疾病导致肝脏不断 损伤和修复的过程，肝纤维化可以迸一步发展为肝硬化甚至肝癌。目前，肝纤 维化和肝硬化已成为全球性的健康问题，严重威胁人类的身体健康，近年来肝 硬化患者死亡率急剧增加。所幸研究表明，肝纤维化是可以逆转的，但是肝硬 化不容易逆转，因此成功地治疗肝纤维化，可以减少肝硬化和肝癌患者的发病 率和死亡率。目前临床对肝纤维化和肝硬化唯一有效的治疗方法就是肝移植， 但是肝移植存在供体有限、成奉高昂并需要终身免疫抑制治疗等缺点，因此弄 清肝纤维化发生发展机制，提供有效的治疗方法，控制肝硬化的发生发展是目 前肝纤维化研究的重大科学问题。 无论什么原因引起的肝纤维化，其主要机制均与细胞外基质(ExtraceIlular m㈨tri ECM)合成增多和降解相对不足有关。肝损伤因子导致肝细胞损伤坏死， Stellate 引起多种因子分泌，细胞因子作用于静息状态的肝星状细胞(Hepatic Cell，HSC)，使其激活、转化为成肌纤维细胞。HSC是产生细胞外基质的主要 细胞，活化后a—SMA表达增多，合成胶原能力增强，分泌大量的ECM．使肝脏 ECM的合成与降解失衡，ECM在肝脏过度沉积导致肝脏结构改变，从而引起肝 纤维化甚至肝硬化。I-ISC活化后产生的细胞外基质成分包括胶原、糖蛋白、蛋 中文摘要 白多糖及多种细胞因子；细胞因子包括TGFf)I、TNF．0【、干扰素吖、白细胞介素 ．1Q等。其中TOFFSl是刺激HSC产生细胞外基质的主要因子，随着肝纤维化发 生，细胞因子参与的各种信号通路之间的平衡状态被打破，TOFFSl在肝组织中 13 的表达明显增加，增高的TGF1刺激肝脏产生各种细胞外基质并抑制其降解， 促使肝纤维化发生发展。 II型受体结合形成异二聚体，随即被I型 导过程为：TGFpI活化后，与TGFl5 受体识别并结合组成受体异聚体复合物，异聚体复合物中的I型受体被II型 受体磷酸化，磷酸化的I型受体将信号放大并进一步磷酸化胞浆中的Smad3或 I)型受体可被 细胞核内与靶基因结合调控其转录和表达。其中TGFf)II(TpR I型受体ALK5激酶的ATP结合位点 小分子化合物SB431542抑制，它和TISR 白在核内聚集，减缓纤维化进程。 Slit2一Robol是最初在果蝇神经系统发育中被发现的一种信号通路，它不仅 在神经系统轴突导向生长、神经元迁移、哺乳动物前脑嗅球的形成中起重要作 用，在脊椎动物非神经系统发育中也具有重要作用，如参与乳腺和卵巢的发育。 目前研究表明，Slit2．Robol也参与多种病理过程，如可以抑制白细胞趋化、抑 制炎症过程中皮肤部位郎罕氏细胞的迁移运动；参与血管的发生及肿瘤新生血 管的形成，抑制血管平滑肌细胞的迁移；参与神经胶质瘤、肺癌、乳腺癌、结 直肠癌、肝细胞癌等多种肿瘤发生和转移。肝癌大多发生在肝硬化基础上，肝 硬化又由慢性肝炎、肝纤维化发展而来，结合上述Slit2．Robol在炎症和肝癌中 的作用，我们推测Slit2．Robol可能在“慢性肝炎．肝纤维化．肝硬化．肝癌”进程 中发挥重要作用。 目的 13 达变化和相互联系，初步探讨Slit2．Robol通过TGFl-Smad3信号通路在肝纤 博士学位论文 维化中的作用，为肝纤维化的诊断和治疗提供新思路。 方法 1．CCl4诱导C57和Slit2．Tg小鼠肝纤维化模型的建立 CCh橄榄油溶液，每周注射2次，分别注射2周、4周、6周、8周，比较