sp1基因沉默前列腺癌细胞cd59表达调控的作用研究.pdf

I基因沉默对前列腺癌细胞CD59表达调控的作用研究 Sp 中文摘要 of 研究背景：前列腺癌(carcinomaprostate)在欧美发病率极高，近年来，随着人口老龄 化、生活环境和饮食习惯的改变，前列腺癌在我国发病率呈明显上升趋势。前列腺癌大多为腺 癌，常从前列腺的外周发生，最终经局部、淋巴和血行扩散转移。该肿瘤发病隐匿，早期很难 察觉，分子生物学方面的研究已经成为发现、诊断、治疗该疾病的热点。CD59广泛分布于造血 attack complex，姒C) 细胞及多种组织细胞表面，保护宿主细胞免受补体攻膜复合物((membrane 的攻击。近年来，国内外研究发现在多种实体肿瘤细胞中CD59分子高表达，推测可能与肿瘤的 发生、发展有关，但其发生机制尚不明确。生物信息学分析，CD59启动子区域没有典型的TATA GC盒有很强的亲和力，与许多靶基因的启动转录有关，在细胞增殖、凋亡、分化和肿瘤形成等 过程中起非常重要的作用。研究发现，Spl高表达与胃癌、胰腺癌，前列腺癌的恶性程度呈正 相关，与患者的生存期呈负相关，是影响患者预后的重要因素。因此，以Spl基因作为分子靶 标，有望为肿瘤基因治疗开辟一条新途径。 研究反式作用因子 目的：构建针对Spl基因siRNA真核表达载体，转染前列腺癌细胞PC一3， Spl对CD59表达的调控作用。 经脂质体法转染前列腺癌PC-3细胞，G418筛选稳定表达转染该基因的阳性细胞克隆，荧光倒 置显微镜下观察转染效率，RT-PCR及Westernblot检测转染细胞中Spl和CD59基因的表达情 况，流式细胞术检测CD59的表达，MTT及染料释放试验检测CD59基因抑制后肿瘤细胞对补体 溶破的抵抗作用。 表达量均明显降低，流式细胞仪检测CD59分子的表达减少，M1vr和染料释放实验表明CD59基 因受抑制后肿瘤细胞对补体溶破的抵抗作用降低。 式作用因子Spl是CD59表达调控中重要的转录因子，该研究为CD59在肿瘤细胞中高表达的分 子机制提供了新思路，将为肿瘤基因靶向治疗开辟一条新途径。 硕士研究生梁岩(免疫学) 指导教师 高美华教授 RNA干扰；前列腺癌 关键词CD59；Spl；启动子；补体； l l l ll 11)lII IllllIIl lUl 英文摘要 Theeffectof on ofCD59in silencingSplgeneexpression prostate cancerceil RNAinterference by Abstract adenocarcinomaisthemost noncutaneouscancerand Prostate Backgroud commonlydiagnosed deathsin due second catl$eofcancarelatedmen．Deathto can(冶risattributedto le