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sox2、bru及nestin阳性细胞在穹窿下器内分布情况及形态学观察
中文摘要
观察
摘 要
目的:观察穹窿下器中神经干细胞的分布及形态。
①对照组(n=12):不作处理;②用药组(n=10)。
天,制备BrdU模型。
2、免疫组织化学染色:正常动物常规麻醉,经心灌注,取材,固定,
BX.UCB显微照相系统观察
和Sox2免疫组织化学染色,封片后Olympus
照像。
醉,经心灌注,取材,固定,蔗糖浸泡后选含穹窿下器部分,冰冻切片,
BX.UCB显微照相系统观察照像。
后Olympus
4、BrdU标记实验动物免疫组织化学染色:BrdU模型动物常规麻醉,
经心灌注,取材,固定,浸蜡包埋,选取含穹窿下器部分,石蜡切片,厚
BX.UCB显微照
度为5urn,经BrdU免疫组织化学染色,封片后Olympus
相系统观察照像。
动物常规麻醉,经心灌注,取材,固定,蔗糖浸泡后选含穹窿下器部分,
BX.UCB显微照相系统观察照像。
甘油封固后Olympus
Plus6.0
6、统计学处理:阳性细胞采用专业图像分析软件Image.Pro
为有显著性差异。
结果:
中文摘要
l、甲苯胺蓝染色结果观察
光镜下,经甲苯胺蓝染色后,可以看到SFO内有丰富的毛细血管分
布,两外侧区有一些较大的血管,血管周围的组织排列较紧密,核心区域
是微血管。室管膜细胞呈单层排列,细胞形态呈梭形,细胞表面光滑,细
胞核大小不等,呈椭圆形或圆形。SFO内的细胞分布并不均匀,在大血管
周围,SFO的外周区以及第三脑室的室管膜层,以上部位的细胞为大细胞,
胞体较丰满,染色比较均匀,但突起并不明显,细胞核呈椭圆形或圆形。
其余部位的细胞一般较小,主要分布于SFO中心区的小血管四周。在SFO
中心区分散了一些体积较大的细胞。血管间隙内可见胞浆内含有微小气泡
的神经内分泌样细胞,此种细胞胞体较丰满,突起较少,且长度较短。
2、免疫组织化学结果观察
2.1
密,胞核为中等大小,呈圆形或椭圆形,中间部较两侧边缘部SOX2阳性
细胞多,SFO内血管周围的SOX2免疫阳性细胞较少,室管膜处可见单层
排列的SOX2免疫阳性细胞,而与SFO相连的海马腹侧联合内,只有少
量的阳性细胞,侧脑室室管膜的阳性细胞呈单层紧密排列。脉络丛未见阳
性表达。SFO两侧部SOX2免疫阳性细胞的平均光密度值为
0.37834-0.025l,中间部SOX2免疫阳性细胞的平均光密度值为
0.5
O.2185士0.0473。SFO两侧部与中间部比较结果显示有显著性差异(尸
0.05),SFO与海马腹侧联合比较结果显示有显著性差异(PO.05)。
2.2
管周围,SFO的外周区以及第三脑室的室管膜层,血管周围可见围绕血管
的阳性表达。侧脑室的室管膜内可见单层紧密排列的阳性细胞。脉络丛内
也可见阳性表达。SFO相连的海马腹侧联合内,未见阳性细胞。SFO两
侧部比中间部阳性细胞多。SFO两侧部Nestin免疫阳性细胞的平均光密
0.05)。
2.3
数量较少,所有分布位置不恒定。
中文摘要
3、免疫荧光组织化学结果的观察
3.1
免疫荧光阳性细胞排列紧密,胞核中等大小,呈圆形或椭圆形,SOX2阳
性细胞分布广泛,遍布整个SFO,但中间部较两侧边缘部SOX2免疫荧光
阳性细胞多,而SFO内血管周围的SOX2免疫阳性细胞较少,.室管膜处
可见单层排列较整齐的SOX2免疫阳性细胞。BrdU免疫荧光阳性细胞的
较少,有少量细胞同时存在两种阳性表达。
3.2
免疫荧光阳性细胞分布不均匀,主要分布于大血管周围,SFO的外周区以
及第三脑室的室管膜层。SOX2免疫荧光阳性细胞分布广泛,遍布整个
血管周围的SOX2免疫阳性细胞较少,室管膜处可见单层排列较整
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