cgrp8-3对甲醛炎性痛大鼠自发性痛反应及脊髓后角nos表达的影响.pdf

中文摘 要 CGRP8-37对甲醛炎性痛大鼠自发性痛反应及脊髓 后角NOS表达的影响 摘 要 外周伤害性刺激可引起持续性疼痛及痛觉过敏。实 验表明，足底注射甲醛引起的炎性痛时，脊髓后角一氧 化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)表达增加，同时一氧 化氮(nitricoxide，NO)的合成增多。在多种疼痛模型中 也证实，鞘内注射NOS抑制剂可以明显减轻动物的疼痛 行为，并抑制痛觉过敏的产生。可见，脊髓后角NOS表 达及 NO含量增多在痛觉信息传递和痛觉过敏产生中发 挥重要作用。一般认为，伤害性信息传入引起的脊髓后 角NOS表达增多与初级神经元释放的兴奋性氨基酸增加 及其NMDA受体激活有关。 实验也证明，伤害性信息传入时，脊髓背根神经节 (dorsalrootganglion,DRG)感觉神经元内降钙素基因相关 肤 (calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)mRNA表达 上调，使神经元内CGRP生物合成增加，并在脊髓后角 释放增多。说明CGRP与其受体结合参与伤害性信息的 传递，并有可能参与痛觉过敏的形成。CGRP在促进伤 害性信息传递和痛觉过敏产生中的具体机制尚未完全搞 清，其是否也通过影响脊髓后角神经元内NO的产生而 发挥作用尚未见报道。本研究的目的有两个方面: (1) 观察CGRP受体拮抗剂CGRP8-37对甲醛诱致的大鼠持 中文摘 要 续性自发痛行为反应的影响。 (2)观察 CGRP拮抗剂 CGRP8-37对大鼠甲醛炎性痛及痛过敏时脊髓后角NOS 表达的影响。为进一步阐明CGRP在伤害性信息传递及 痛觉过敏产生中的作用及机制提供依据。 1.CGRP8-37对甲醛诱致的持续性自发痛反应的影响 健康纯种SD大鼠24只，雌雄不拘，随机分为四组 (n=6)，分别为对照组和CGRP8-37lnmol,5nmol, lOnmol组。其中对照组鞘内注射loul生理盐水，其余各 组鞘内注射不同浓度的CGRP8-3710u1。鞘内注射 生 理盐水或药物后 10分钟右后掌皮下注射 5%甲醛。于 注射甲醛后每 5min记数大鼠注射侧的自发性缩足反射 次数，持续观察60mino 结果发现，鞘内给予 CGRP受体拮抗剂 CGRP8- 37,lnmol对甲醛诱导的持续性自发性缩足反射行为抑 制作用不明显 (p0.05);然而，5nmol和10nmol可 使甲醛诱导的持续性自发性缩足反射次数明显减少。与 对照组相比，第一阶段 (0-1Omin)和第二阶段 (10- 60min)均具有显著统计学意义 (p0.05)。 以上结果表明，皮下注射甲醛可诱导持续性自发性 疼痛的发生，鞘内注射 CGRP受体拮抗剂CGRP8-37可 明显抑制注射侧持续性自发性痛行为反应。 2.CGRP8-37对大鼠甲醛炎性痛过程中脊髓后角NOS表 达的影响 健康纯种SD大鼠48只，雌雄不拘，随机分为四组 (n=12)，分别为对照组、甲醛 24h组、甲醛+NS 组、甲醛+CGRP8-37组。其中甲醛 24h组、甲醛+NS 中文摘要 组和甲醛+CGRP8-37组均采用右后掌皮下注射5%甲醛 致炎。并于注射甲醛后24h多聚甲醛灌注固定取材或断 头取材，观察脊髓后角NADPH-d阳性细胞数目及染色 深度改变及脊髓腰膨大部位 NO含量的变化，以探讨 CGRP8-37对甲醛所致脊髓后角NOS表达及NO含量的 影响。 结果发现，对照组脊髓后角I-III板层NADPH-d阳性 细胞数目较少，染色较浅，左右两侧无差异。与对照组 相比，甲醛 24h组和甲醛+NS组大鼠脊髓后角I-III板层 NADPH-d阳性细胞数目明显增加 (P0.01)，并且这 些阳性细胞的染色深度亦明显增加 (灰度值明显减少) (P0.01)。此外，脊髓后角I-III板层和IV-VI板层背景 (去除神经细胞)NADPH-d染色深度以及脊髓腰膨大 部位NO含量均明显增加 (P0.01)。甲醛+CGRP8- 37组与甲醛 24h组相比，则双侧脊髓后角I-III板层 NADPH-d阳性细胞的数目明显减少 (P0.01)，并且