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CLIC 1和ECH1在小鼠腹水型肝癌高、低 淋巴道转移细胞株中的表达及意义 硕士生姓名：宋美英 指导教师：唐建武教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 目的：统计资料显示，恶性肿瘤跃居我国城市居民疾病死因首位， 国外肿瘤是其次于心血管疾病的第二大致病因素，侵袭、转移是其恶性 生物学行为的原因，其中淋巴道转移主要是上皮来源的肿瘤转移的方式， 也是肿瘤早期的主要转移方式，但是其作用机制不清楚。我们实验室通 过比较小鼠腹水型肝癌高低淋巴道转移细胞株的差异因子，寻找在淋巴 道转移中可能发挥作用的蛋白。基因芯片和蛋白组学方法得到大量差异 表达的因子，为肿瘤淋巴道转移机制深入研究提供了靶点。我们发现细 和蛋白水平在高淋巴道转移细胞株Hca．F中高表达，可能在肿瘤转移中 发挥重要的作用。CLICl作为膜通道蛋白，具有可溶型和膜结合型两种 1在多种肿 形式，分布各种组织中，参与重要生理过程。近年报道CLIC 瘤中高表达，但是未见关于淋巴道转移方面的报道。ECHl分布于过氧 化物酶体，是脂肪酸13氧化过程中加水反应的关键酶，在多种肿瘤中异 常表达，但也未见肿瘤淋巴道转移方面的报道。本文主要研究CLICl和 ECHl在小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株Hea．F和低淋巴道转移细 胞株Hea．P的细胞定位及蛋白表达差异，为进一步研究奠定基础。 方法：小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移株Hea．F和低淋巴道转移株 Hca．P作为研究对象，观察细胞免疫荧光和免疫化学染色检测定位情况， 并以WestenBlot方法检测蛋白表达情况。 结果： 细胞免疫荧光：CLICl在Hea．F和Hea．P均有表达，位于细胞浆、 细胞膜。但是两株细胞株细胞膜定位差异不是很明显。ECHl在Hca—F 和Hea．P中均有表达，位于细胞浆。 细胞免疫化学染色：CLIC l在Hca．F和Hca．P中均有表达，位于细 胞浆、细胞膜。染色强度+++：在Hea．P的染色强度++，并且镜下随机 选取10个视野，观察细胞膜定位的比率，统计分析结果显示CLICl在 是0。285，P0．05。 Wstern (IOD)，以CLICl在Hca．P中的表达相对值为1，在Hca．F中高表达1．6 Hca．P高1．5倍，具有统计学意义(尸0．05)． 胞膜定位没有明显的差异，并且CLICl在Hca—F中的表达明显高于 Hca．P，与基因水平和蛋白水平的的实验结果一致，更加证明了CLICl 和ECHl在肝癌淋巴道转移中的潜在作用。 ECHl 关键词：CLICl 肿瘤 肿瘤转移 I ■量 a 刘 SS ∞ S．0 “n a C．H m胍 e n“d n骶缱 u．呈衙n沌a瞄叫_．叭．暑 ， S．1-．I 酽胁札，Lr● C亿m灌 垤 a ●l 鹏毗w 垤∞以d 引∞b 叭K叩 1．2一 meiying candidateSong Masterdegree Tangjianwu Professor：Professo