clustern在ta2小鼠自发性乳腺癌发生过程中的作用及相关机制.pdf

天津医科大学硕士研究生论文 中文摘要 正常TA2和TAld、鼠乳腺组织中的表达差异，观察CLU两种亚型在乳腺上皮细胞和 肿瘤细胞中表达、分布，在此基础上阐述CLU在TA2自发性乳腺癌发生过程中的 相关机制。 方法： 1．提取4例TA2自发乳腺癌小鼠肿瘤组织及其正常乳腺组织、4例TA2d、鼠和4例 较CLUmRNA在各组乳腺和肿瘤组织中的表达差异。 2．利用Westernblot检测上述4种标本中两种CLU蛋白亚型表达差异，阐述CLU 在TA2自发性乳腺癌发生发展过程中的作用。 3．采用免疫组化SABC法检测TA2自发乳腺癌小鼠肿瘤组织、正常乳腺组织及TA2 小鼠和TAld、鼠乳腺组织内CLU在乳腺导管上皮细胞和肿瘤细胞中表达、分布。 4、采用SPSSl1．0对数据进行统计及检验。多个样本均数的比较先进行方差齐性 检验，方差齐的多组样本均数采用SPSS10．0中单向方差分析中的LSD进行两两 比较，方差不齐采用校正公式，以尸O．05为相差显著。 结果： 1．单因素方差分析结果显示CLUmRNA在4组样本间表达的差别有统计学意义(F= 15．699，尸0．01)。两两比较提示TA2自发乳腺癌小鼠正常乳腺组织CLUmRNA表 mRNA 达显著上调，高于其它各组(尸0．05)；TA2自发乳腺癌小鼠肿瘤组织CLU mRNA 表达高于TAld、鼠，但差别无统计学意义。 组织CLU的主要形式是sCLU；在TA2自发性乳腺癌小鼠正常乳腺和肿瘤组织中 sCLU表达显著上调，nCLU表达下调／缺失。 3．Western blot检测结果显示sCLU蛋白在上述4组标本中的表达不同，其差异具 天津医科大学硕士研究生论文 癌小鼠正常乳腺组织中表达显著上调，高于其它各组(尸0．05)；TA2自发乳 小鼠正常乳腺组织中sCLU表达高于TAl小鼠，但差别无统计学意义。 4．免疫组化染色结果提示CLU在正常TAl小鼠的乳腺导管上皮细胞内的阳性表达 部位主要位于细胞核；在正常TA2，J,鼠乳腺导管上皮细胞胞浆内可见较多的阳性 颗粒，部分细胞的胞核也出现阳性表达；CLU在TA2自发乳腺癌小鼠正常乳腺导 管上皮和肿瘤细胞阳性表达部位主要位于细胞浆。 结论： 1CLU蛋白存在两种亚型，sCLU和ncLU。这两种亚型对细胞生长、增殖调节的作 用是相反的：sCLU具有细胞保护作用，抑制细胞凋亡；ncLU可促进细胞凋亡， 肿瘤的发生发展可能与sCLU和nCLU表达异常有关。 2研究发现CLUmRNA和sCLU在TA2自发乳腺癌小鼠正常乳腺组织显著上调，在TA2 自发乳腺癌小鼠肿瘤组织中表达上调，提示sCLU异常表达可能与乳腺癌的发生 发展有一定关系，其表达上调可能是乳腺癌发生的早期事件。 组织CLU的主要形式是sCkU；在TA2自发性乳腺癌小鼠正常乳腺和肿瘤组织中 sCLU表达显著上调，ncLU表达下调／缺失，提示乳腺癌的发生发展可能与sCLU过 表达和／或ncLU缺失有关。 4在TAl小鼠乳腺组织CLU阳性表达部位主要位于乳腺导管上皮细胞核内，推测 其为nCLU；TA2自发乳腺癌小鼠正常乳腺导管上皮和乳腺癌细胞内CLU阳性部 位主要位于细胞浆内；提示两种clusterin蛋白亚型表达水平和表达部位的变 化与TA2自发性乳腺癌的发生有关。 blot； Ⅱ 天津医科大学硕士研究生论文 Therelatedmechanismofclusterin andTA2mouse expression breastcancer spontaneous development Abstra