延迟整流kl;#39;+gt;离子通道与nit细胞凋亡机制的相关性研究.pdf

虞涛 华中科技大学同济医学院硕士研究生论文 延迟整流K+离子通道与NIT细胞凋亡机制 的相关性研究 研究生：虞涛 导师：沈关心教授 摘要 目的 本文主要研究NIT细胞凋亡发生机制与延迟整流K+通道间 的相关性。 方法以1型糖尿病中主要的致病因素(IFN．Y+IL一1B、NO)诱 导NIT细胞凋亡，同时加入心通道阻断剂TEA，通过AnnexinV检测、 PI染色、Rhodamine 123染色，利用FCM检测TEA对诱导NIT细胞凋 亡的影响；并用MTT法观察其对细胞活性的影响；通过硝酸还原酶法、 硫代靶比妥酸TBA法、黄嘌呤氧化酶法、化学比色法分别测定培养上 清中亚硝酸盐和丙二醛含量以及细胞裂解物中SOD、NOS活性；利用 全细胞膜片钳技术观察诱导NIT细胞凋亡前后延迟整流钾电流的变化 情况。 结果TEA可显著抑制IFN．Y+IL-1 B及STZ(NO供体1诱导的NIT 细胞凋亡及细胞形态的改变，此抑制作用可能发生在凋亡的线粒体途径 活化之|i仃：TEA可显著抑制IFN—Y+IL．10及STZ诱导的NIT细胞合成 B及 STZ诱导的细胞凋亡中存在一外流显著增强现象，该现象可能同延迟 虞涛 华中科拄太学同济匪学院工正士研究生论支 整流K+通道的活化有关。 结论C外漉可能在NIT细胞凋亡的发生早期起重要作用，TEA 可抑制IFN—Y+IL一1B及STZ诱导的NIT细胞凋亡。其抑制机制可能同 增强SOD活性，下调NOS活性，从而减少凋亡诱导细胞合成NO及 ROS密切相关。延迟整流K‘通道的活化参与魍亡过程中K+外流，它可 能在NIT细胞凋亡的发生中起重要作用。 关键词延迟整流K十通道细匏襁亡NIT细胞TEA更外漉 2 虞涛 华中科技大学同济医擘院硕士研究生论丈 Studieson between the Rectifier Delayed Relationship the ofNITCells K+ChannelsandApoptosis Abs仃act the between rectifier objective：To K十 studyrelationshipdelayed channelsandthe ofNITcell． apoptosis STZ Methods：IFN-7(1000U／mL)plusIL-1B(50U／mL)and usedtoinducethe ofNIT．1 (8mmol／L)were apoptosis cells．1mmol／LTEA kindof K+channelWaS to (a blockerl c