异种骨移植修复缺损的实验研究.pdf

中文摘要 异种骨移植修复骨缺损的实验研究 摘 要 目的：骨组织再造和骨缺损修复一直是临床上骨科医生 面临的难题之～，组织工程学的创立为解决这一难题提供了 新的思路和方法。骨组织工程(bonetissueengineering)是目前 组织工程研究的热点问题之一，内容主要包括：①细胞种植 基质材料的研究与开发；②种子细胞性质的研究；③与促进 骨再生有关的生长因子方面的研究。其中，细胞种植基质材 料的研究是骨组织工程研究的核心内容，也是能否应用于临 床的重要因素之一。本研究采用NaOH消蚀脱细胞技术制备 出猪的长骨密质骨及松质骨骨细胞外基质f简称骨基质)材料 作为支架，以自体新鲜红骨髓作为骨形成的促进因子，对家 兔进行了骨缺损修复的实验研究。 方法： 1取猪的长骨的骨密质及髂骨的骨松质，经2％戊二醛 ／4％多聚甲醛混合液交联后，室温下经过6％NaOH水溶液 化学消蚀脱细胞7天，蒸馏水超声震荡清洗，彻底清除细胞 碎片及残存药液，直至清澈透明为止，pH值7，烘干。对 electric 制备好的两种骨基质材料进行扫描电镜(scanning 察其生物相容性。 2骨基质支架复合自体红骨髓修复家兔胫骨局部性骨 缺损的实验研究：将两种支架与自体红骨髓复合后，植入保 留有骨膜的兔胫骨干12ram长，深度达胫骨直径的1／3厚度 中文摘要 的前壁骨缺损动物模型中。分为A、B两个实验组，A组移 bonematrix 植密质骨基质支架(compact frame，CBMF)，B bonematrix 组移植松质骨基质支架(spongy frame，SBMF)， 对照组D组为空白对照组。红骨髓自髂嵴处抽取，每处注入 约0．10ml，注入缺损处密质骨支架周围或松质骨支架孔隙 内，骨膜原位缝合。分别于术后4周、8周、12周观察x线 表现及组织学变化。 结果： l骨基质支架特征 1．1骨基质材料的SEM特征：骨组织经NaOH消蚀及超 声震荡清洗后，细胞成分被彻底消蚀掉。密质骨骨基质的主 要成分胶原纤维和骨盐仍维持原有形态及结构特征，胶原纤 维聚集、排列成规则的网状支架。骨盐沿胶原纤维排列。松 质骨呈疏松的绒毛样结构，表面略粗糙，可见胶原纤维纹理。 1．2生物力学测试结果密质骨基质材料的三点抗弯曲 O．1 082N，经NaOH消蚀后，力学强度略低于正常骨组织(分 别为p0．05，p0．01)。 1．3生物相容性实验结果：将埋植于家兔背部肌肉中的 两种支架材料分别于术后l周、2周和4周取出。可见密质 骨周围有纤维结缔组织包裹，少许淋巴细胞浸润和新生毛细 血管；松质骨材料于埋植一周后即有结缔组织长入松质骨基 质的孔隙内。随着埋植时间的延长密质骨支架结构逐渐疏 松，松质骨支架逐渐减少，被降解吸收。 2骨支架移植实验结果： 中文摘要 2．1X线检查结果：术后4周，实验组围绕缺损区骨膜下 形成连续性致密骨痂跨越缺损区，有早期成骨现象，其中B 组最明显，A组骨痂密度稍低于B组，D组骨痂，不连贯， 无成骨现象：术后8周，A组、B组骨痂贯穿骨支架，出现 骨性连接并开始塑形，D组成骨现象较A组B组慢。术后 12周，B组可见清晰的骨纹理，形成新的骨皮质且较光滑， 骨缺损修复较完善；A组骨小梁通过，骨修复、塑型较B组 出现晚， 由于缺损部位尚小，D组也被新生骨痂填充塑形。 A组与B组对比，术后4周，骨痂B组多于A组；术后8 周，B组较A组成骨增多，塑形现象出现早；术后12周，B 组可见清晰骨小梁，骨皮质较光滑，骨缺损修复完善，A组 见部分骨小梁通过，骨修复、塑型较B组出现晚。由于缺损 区较小，D组到12周时骨痂填充塑形亦较完全。 2．2组织学观察术后4周，实验组在移植物表面及孔洞 内有新生骨组织形成，B组