不同表达水平微rna-155对人滋养细胞增殖的影响.pdfVIP

中文摘要 不同表达水平微小RNA．155对人滋养细胞 增殖的影响 摘要 背景和目的：微小l埘A一155(miR-155)在子痫前期患者胎盘组织的表达量较 正常孕妇显著升高，miR-155可调控细胞周期蛋白的表达。本实验主要研究不同 表达水平的miR一155通过靶向调节细胞周期蛋白影响人滋养细胞的增殖。方 法：通过生物信息学检索发现，细胞周期蛋白D1(cyclinD1)是miR-155的靶基 贝组，双拷贝组和对照组三组，分别将含单拷贝、双拷贝InjR-155基因片段的 neo中；转 Dl 染后24h，利用实时定量PCR检测细胞内miR．155和cyclinIIⅡⅢA的表达， Dl蛋白水平的表达；利用流式细胞技术检测 w|estem．Blotting检测cycliIl HTR-8／SV neo细胞周期；CCK-8试剂盒检测HTR．8／SVneo细胞增殖能力。结 果：转染24h后，单拷贝组和双拷贝组miR-155的表达分别较对照组上升 D1删5矾A的表达水平分别是对照组的0．60士0．05倍和 贝组和双拷贝组cyclin O．39士O．02倍，且双拷贝组显著低于单拷贝组(尸≮0．05，n_5)。对照组，单拷贝组和 双拷贝组HTR．8／SV 拷贝组的细胞增殖活力分别为对照组的79．13士4．5％和59．52士3．3％。单拷贝组和 D1 mRNA水平和蛋白水平分别较对照组明显降低，且双拷贝组 双拷贝组cyclin 降低更明显。结论： D1的表达，抑 miR-155可在体外下调细胞周期蛋白cycliIl 制人滋养细胞的增殖，使细胞停滞在G1／S期，这种抑制作用与IniR-155表达水 平呈正相关。 英文摘要 EffectsofmiR一155onthe of proliferation human ceU觑V觑唧 trophoblast Abstract leVelofmicmI之NA一155waS increaLsediIlⅡle of Bacl‘gmund：7nle placenta wiⅡl women 55can me ofcell pre印aIlt pre-ecl锄psia．miR-1regulate expression of waSto me mleofmiR—155on cycleproteiIls．111e撕mthis咖dy investigate human of cells．Methods：7rhemiR-l55 proli缸嘶0n trophoblaSt genc矗agmentS