第十三章高效液相色谱法摘要.pptVIP

第二十二章 高效液相色谱法 目的要求： 熟悉HPLC的基本原理和测试技术。 ★掌握HPLC的定量分析方法。（重点） ●了解HPLC在中草药研究中的应用 第一节 高效液相色谱仪 高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法. 一、HPLC与经典LC区别 二、HPLC与GC差别 三、HPLC特点 一、HPLC与经典LC区别 主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段 1．经典LC：仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm，固定相粒径100μm 且不均匀,柱效低（H↑，n↓） 常压输送流动相, 分析周期长,无法在线检测 2．HPLC：分离和分析 柱内径2~6mm，固定相粒径10μm（球形， 匀浆装柱）, 柱效高（H↓，n↑） 高压输送流动相, 分析时间大大缩短 可以在线检测 二、HPLC与GC差别 相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测 主要差别：分析对象的差别和流动相的差别 1．分析对象 GC：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品不可检测 ，占有机物的20% HPLC：溶解后能制成溶液的样品，不受样品挥发性和热稳定性的限制 ，分子量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测