hif-1a和ox-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.pdf

HIF．1 Q幂ncox．2蛋白在非小细胞肺癌 中的表达及临床意义 摘 要 正常肺组织中的表达，初步探讨它们在非小细胞肺癌(NSCLC)的 发生、侵袭和转移中的作用。方法：用免疫组织化学SP法检测30 为手术切除获得，术前患者未作任何放疗或化疗。30例正常肺组织 作对照。将组织标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋，常规49in连 续切片。将石蜡切片常规脱蜡至水后，蒸馏水冲洗，磷酸盐缓冲液 buffer (phosphate 过氧化氢甲醇液9呼育10rain以消除内源性过氧化酶活性。用正常山羊 血清封闭交叉反应引起的非特异性着色。滴加一抗(HIF．1et兔抗人 多克隆抗体的稀释度1：200；COX一2兔抗人多克隆抗体稀释度l：50) 孵育，PBS冲洗后，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。滴加生物素 标记二抗孵育，PBS冲洗后滴加辣根酶标记链酶卵白素工作液 复染，酸化，蓝化，梯度脱水，透明，封片，显微镜观察。注意控制 背景。以细胞浆或者细胞核内出现棕黄色颗粒或者棕黄色团块为阳性 细胞。HIF．0c的阳性信号主要位于细胞核中，部分位于细胞浆中，细 胞间质中也可见表达：而COX．2的阳性表达信号主要位于细胞浆中。 按每张切片阳性细胞比例数、着色深浅划分为．、+、++、卅共四个 l 等级。基本不着色或者着色细胞少于5％为(．)，着色浅淡或者着色 细胞占整张切片5％～25％为弱阳性(+)，着色适中或者着色细胞占整 张切片26％～50％中度阳性(++)，着色深或者着色细胞占整张切片超 明显高于正常肺组织(尸0．01)，但它们的表达与患者的年龄、组织 分化程度、TNM分期、病理类型、吸烟、性别及有无咳血等临床病 中存在HIF．a和COX．2的过度表达，均明显高于正常肺组织，说明 两者可能均参与了非小细胞肺癌的致癌过程。(2)H1F．1a蛋白、COX．2 蛋白在非小细胞肺癌组织的表达与患者的年龄、组织分化程度、TNM 分期、病理类型、吸烟、性别及有无咳血等临床病理因素无关，提示 他们与非小细胞肺癌的进展、侵袭和转移可能无关，或者关系不大。 (3)HIF．1a蛋白、COX．2蛋白在非小细胞肺癌组织的表达成正相关， 达，可能共同促进细胞的恶性转化，从而促进非小细胞肺癌的形成。 关键词：HIF．1O【；COX．2；非小细胞肺癌 The ofH IF—laandCOX一2 innon．small expression protein cell carcinomaanditsclinical lung significance Abstract theeffectsofHIF·-laandCOX．．2in Objective：Tostudypreliminarily the andmetastasisofnon—small occurrence，invasion cell cancer lung the oftheminnon．smallcell (NSCLC)by detectingexpression lung cancer(NSCLC)andinnormaltissue．Methods：TodetectHIF．1a lung andCOX··2