胸腺素β4在tnon囊成纤维细胞中的表达及ctgf对其表达的影响.pdfVIP

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 胸腺素 β 在 Tenon 囊成纤维细胞中的表达及 4 CTGF 对其表达的影响 华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科 硕士研究生：穆歌 导师：曹阳 副教授 摘 要 目的：胸腺素β （thymosin β4 Tβ ）是一种重要的G-肌动蛋白偶联蛋白,参与 4 4 调控不同组织的炎症反应和创伤愈合，本实验的目的是从分子生物化学水平检测 人Tenon囊成纤维细胞(human Tenon’s capsule fibroblasts , HTFs)中 Tβ 的表达， 4 并研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)对其表达的影 响。 方法：体外培养原代 HTFs ，传代后取 3~4 代细胞进行实验。一步法提取 HTFs RNA，应用 RT-PCR 检测 Tβ mRNA 的表达，并用免疫组化法检测细胞中 Tβ 蛋白 4 4 的表达。选用终浓度为0 ng/ml（对照组）、1.0、10. 0 及100.0ng/ml CTGF处 理上述细胞 24 小时，半定量 RT-PCR 反应观察 CTGF 对体外培养 HTFs Tβ4 mRNA 表达的影响，以β-actin 作为内参照。 实验结果：RT-PCR扩增得到单一产物，免疫组化结果显示 Tβ4 在体外培养的HTFs 胞浆中表达阳性，胞核中表达阴性。半定量 RT-PCR 检测结果经图像分析得到， 1.0、10. 0 及100.0ng/ml CTGF 处理组的 Tβ/β-actin 的吸光度比值分别为 1.11 4 ±0.04，1.05±0.03，0.82 ±0.06，与对照组比值 1.23±0.02 比较差异有显著意义 （P0.05 ）。Tβ/β-actin 随着 CTGF 的浓度增大而降低，呈剂量依赖性。 4 结论：体外培养的 HTFs Tβ 表达阳性。CTGF 抑制 HTFs 中 Tβ 的表达，这可能 4 4 是青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化发生的机制之一。 关键词：胸腺素 β ；CTGF ；人Tenon 囊成纤维细胞；滤过泡瘢痕化；青光眼 4 1 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 Expression of Thymosin beta4 in Human Tenon’s Capsule Fibroblasts and the Effect of CTGF on its Expression Candidate: MuGe Supervisors : Prof. Cao Yang Department of Ophthalmology ,Union Hospital ,Tongji Medical College , Huazhong University of Science and Technology