氟化镁陶瓷az1b镁合金体外细胞毒性及干预成骨细胞增殖的实验研究.pdfVIP

目 录 一、论文摘要 中文论著摘要…………………………………………………………………1 英文论著摘要…………………………………………………………………3 二、英文缩略语……………………………………………………………………5 三、论 文 前言日U舀 …………………………………………………………………………6…………………………………………………………………………b 材料与方法…………………………………………………………………7 实验结果……………………………………………………………………12 讨论 …………………………………………………………………………18 结论 …………………………………………………………………………22 四、本研究创新性的自我评价 …………………………………………………23 五、参考文献………………………………………………………………………24 六、附录 综述 …………………………………………………………………………26 在学期间科研成绩……………………………………………………………39 致谢…………………………………………………………………………40 个人简介……………………………………………………………………41 ·中文论著摘要· 氟化镁陶瓷AZ31B镁合金体外细胞毒性及干预成骨细 胞增殖的实验研究 目的 近年来，随着科学技术的进步，对金属植入物生物相容性的要求进一步提高， 将镁合金及镁基复合材料作为骨外科植入材料的研究受到了国内外学者的关注， 成为了新的研究热点，氟化镁陶瓷AZ31B(F．Mg)是中国科学院金属研究所新近研 发的一种含表面生物活性涂层的镁基复合材料，本研究对氟化镁陶瓷AZ31B镁合 金的细胞毒性及其对成骨细胞增殖的影响进行了研究，为表面改性镁合金应用于 矫形外科临床提供实验依据。 方法 参照GB／T16886．5．2003／ISO10993．5：1999医疗器械生物学评价第5部分：体 外细胞毒性试验的评价标准和要求，以钛合金(Ti．6A1．4V)作为阴性对照材料， 采用人成骨样MG63细胞，用不同浓度材料浸提液(100％、75％、50％)与细胞 共培养等方式进行细胞毒性测试，采用MTT比色法测定各实验组中与材料浸提液 共培养48小时后成骨细胞的相对增殖率来判定材料对细胞的毒性程度，并进行统 计学分析比较；用扫描电镜、荧光染色方法观察材料表面成骨细胞的粘附情况并 同时进行材料表面能谱分析；用流式细胞仪检测成骨细胞增殖、凋亡及材料对成 骨细胞细胞周期的影响；用免疫细胞化学方法观察人成骨样MG63细胞与F-Mg、 Ti．6AI．4V共培养4小时后，与成骨细胞粘附、增殖、分化密切相关的MAPK信 号转导通路中ERK信号蛋白的表达情况。 睦田 j皇日7l写 F．Mg不同浓度浸提液的细胞毒性级均为0级，与空白对照组比较差异均无显 著性。在直接接触实验中，SEM及荧光染色示成骨细胞在氟修饰的镁合金表面粘 附生长情况良好，无明显生长抑制表现；FCM示F．Mg材料组成骨细胞凋亡率 ．4V组凋亡率为 0．00244-0．0003，与F-Mg组相比差异有显著性；免疫细胞化学实验结果表明与空白 对照组及Ti一6AI一4V组相比F-Mg组ERK表达增强，提示氟修饰的镁合金可能增 强成骨细胞与材料的粘附，并促进成骨细胞在材料表面伸展、位移，增殖、分化 等功能。 ；口◆匕结论 F-Mg材料与现阶段广泛应用于骨外科临床的Ti一6A1—4V比较具有良好的细胞 相容性，参照GB／T16886．5．2003／ISO10993．5：1999标准属于安全范围，并且可以 促进成骨细胞粘附与增殖，有望成为新一代生物可降解金属材料。 关键词 氟化镁；镁合金；细胞相容性；MAPK信号转导