线粒体转录因子在宫颈癌组织中的表达及意义.pdfVIP

·中文论著摘要· 线粒体转录因子A在宫颈癌组织中的表达及意义 刖 舌 宫颈癌是全球妇女中仅次于乳腺癌的第二个最常见的恶性肿瘤。在我国，宫 颈癌的每年新发病例为13．15万，约占世界新发病例的三分之一【11。死亡率居女性 癌症死亡率的第二位，在女性生殖器官癌症中居首位。肿瘤的生物学特性不仅取 决于核内遗传物质，而且与核外的线粒体DNA(mitochondrialDNA，mtDNA)亦 有一定的关系。由于mtDNA无组蛋白的保护，缺乏DNA修复系统，处在高氧化 应激环境中，容易受电子传递链产生的自由基的损伤，与化学致癌物的亲和力较 核基因组高等原因，使mtDNA具有较高的突变率，可能具有潜在的致癌性，就 像外源性遗传物质如DNA病毒或RNA病毒在细胞核基因组中整合，从而诱导细 胞恶性转化一样。 factor 线粒体转录因子A(mitochondrial A，mtTFA)由核基因编码， transcription 在细胞质中合成，转运入线粒体中发挥作用，与mtDNA紧密关联‘21，是线粒体转 录和复制的关键激活子【3】。近年研究发现mtTFA在快速增长的肿瘤中表达上调， 可能参与调控与肿瘤发生发展有关的基因的表达【4’5】。能够特异性地识别并结合损 伤的mtDNA，结合后，抑制了修复酶对mtDNA损伤的识别和结合，进而导致肿瘤 能与肿瘤发生存在较为密切的关系，本实验即观察宫颈癌组织中mtTFA的mRNA 水平，以期阐明线粒体转录因子A与宫颈癌发生、发展的关系。 实验材料与方法 1、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 标本来源：选择在中国医科大学附属盛京医院妇产科手术切除的宫颈癌患者 的60份标本(其中30例癌组织为实验组，30例癌旁正常宫颈组织为对照组)，癌 旁正常组织均为距癌组织0．5厘米以上的正常宫颈组织(均经病理学证实)。所有 患者术前均未接受放、化疗及激素治疗。 RNA抽提：取约10．20mg的组织，按照RNA提取试剂盒说明书提取组织 RNA。置于紫外分光光度计上波长为260nm和280nm处测量吸光值，计算两者的 比值，选取比值在1．7--2．0者用于逆转录反应。 逆转录eDNA：eDNA合成严格按试剂盒说明书进行，20I-tl的体系，合成的 eDNA储存在．20℃的冰箱中用于PCR反应。 1min，35个循环，72℃延伸10min。 buffer混合，于1．5％琼脂糖凝胶电泳， 结果观察：pCR产物7pl与1I．t16*loading 成像仪观察结果并摄像。 2、统计学处理 1 mtTFAmRNA表达水平用均数4-标准差表示，数据用SPSS6．0统计软件进行统 计学处理，mtTFA 为差异有统计学意义。 实验结果 1、宫颈癌和癌旁正常宫颈组织中mtTFAmRNA的表达 MtTFA在宫颈癌组织中的表达量为0．28士0．10，在癌旁正常组织中的表达量为 0．19 4-0．13，宫颈癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织，两者比较有显著性差 异伊0．05)。 2、比较mtTFAmRNA表达量与临床病理参数之间的相关性 线粒体转录因子A的表达量与病理学分级有关，而与临床分期、有无淋巴结 转移和年龄等临床参数无明显相关性。 结 论 1、mtTFA在宫颈癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织，两者比较有显著 差异(尸0．05)。 2、mtTFA的表达量与病理学分级有关，而与临床分期、有无淋巴结转移和 年龄等临床参数无明显相关性。 3、宫颈癌组织中mtTFA的异常表达可能与宫颈癌的发生、发展有关。 2 关键词 宫颈癌；线粒体转录因子A；逆转录聚合酶链反应 ● 英文论著摘要