体外培养树突状胞的实验研究.pdfVIP

摘 要 论文题目： 体外外周血培养树突状细胞的实验研究 专 业： 肿瘤学 研 究 生： 郭 辉 指导教师： 赵勇刚 教授 摘 要 目的 提取神经胶质瘤患者外周血分离出单核细胞，进行体外培养、诱导产 生树突状细胞，并探讨细胞因子对树突状细胞诱导、分化成熟的影响，为最终临 床应用树突状细胞免疫治疗神经胶质瘤打下基础。 方法 临床收集确诊为神经胶质瘤的患者静脉血共 20 份，每份 20ml ，经淋 巴细胞分离液梯度分离出单个核细胞（PBMC ），贴壁法获得单核细胞后，每个 样本均分为两份，共两组，分别加入 GM-CSF+IL-4 和 GM-CSF+IL-4+Flt3-L 进 行诱导，在相同条件下进行体外培养，隔日半量换液，补充细胞因子，共7 天， 用倒置显微镜观察其形态，并进行流式细胞仪检测其表面标志，对培养结果在获 得率、纯度和细胞表型三方面进行对比。 结果 应用GM-CSF+IL-4 和GM-CSF+IL-4+Flt3-L 两种培养方法均可诱导产 生树突状细胞,而且在树突状细胞的获得率和纯度方面无统计学差异，经流式细 胞仪检测，应用 GM-CSF+IL-4 组所获得的树突状细胞符合不成熟树突状细胞的 表型，而 GM-CSF+IL-4+Flt3-L 组所诱导的树突状细胞表达更高比例的成熟标志 CD83 ，趋向于成熟的树突状细胞表型。 结论 从胶质瘤患者外周血中分离出的单核细胞，经 GM-CSF 和 IL-4 刺激 后，可以诱导、扩增出大量的树突状细胞，该细胞具有典型的树突状细胞的形 态；由 GM-CSF 和IL-4 诱导产生不成熟的树突状细胞，存在Flt3-L 时可诱导生 成成熟的树突状细胞。 关 键 词：树突状细胞；Fms 样酪氨酸激酶3 配体（Flt3-L ）；体外培养；外 周血；胶质瘤 论文类型：应用基础研究 I 摘要 Subject: The Study of Induction Of Dendritic Cells From Human Peripheral Blood Monocytes In Vitro Specialty: Oncology Name: GUO hui Supervisor: Professor ZHAO yong-gang ABSTRACT Objective We separate the monocytes (MNC) from the peripheral blood of patients with malignant glioma. Then the monocytes (MNC) are added different combined cytokines to induce the generation of dendritic Cells (DCs) in vitro. The aim of the study is to investigate the effect of cytokines on the generation of DCs. It will provide the experimental foundation for clinical glioma immunotherapy of DCs. Methods We gathered the peripheral blood 20ml from 20 patients with malignant glioma, the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were