体外培养人网膜脂肪细胞分泌瘦素、脂联素的研究.pdfVIP

英文缩写说明 Ⅱ 学位论文独创性声明 本人李静声明，所呈交的学位论文系在导师杨静教授指导下本人独立完成的研究成果。 文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已 属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果： 1、交回学校授予的学位证书； 2，学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报； 3，本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道 歉。 4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。 论文作者签名：．壅整 学位论文版权使用授权书 本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印 或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 ． 本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位 仍然为山西医科大学． (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名 日期：塑2年上月L日 指导教师签名 日期：玉2Q3 年—JLl月—L日 (本声 学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用) ● 山西医辩大擘曩士擘位论文 人网膜前脂肪细胞分泌瘦素、脂联素 的实验研究 摘 要 目的：通过体外培养人大网膜前脂肪细胞，并诱导分化为成熟脂肪细胞，研究这一过 程中瘦素、脂联素的分泌规律。 方法： 1、选择择期开腹手术病人，要求无全身代谢及内分泌疾病，无服用干预糖及脂肪代 谢的药物史．年龄范围(40±8)岁，体重指数(B砌小于25kg／m2． 2、采用胶原酶消化的方法分离培养人大网膜前脂肪细胞，通过对细胞形态学观察、 MTr比色法作细胞生长曲线、油红O脂肪染色抽提法对细胞鉴定，观察原代培养人前脂肪 ’ 细胞增殖和分化过程。‘ 3、分别在前脂肪细胞增殖过程、及21天的分化过程中收集细胞上清液。用酶联免疫 吸附法同批检测所收集细胞上清液中瘦素和脂联素蛋白含量。 4、统计学处理：分析结果用“均数±标准差”表示，P0．05有统计学意义。 结果： 1、成功地培养了原代人网膜前脂肪细胞。前脂肪细胞形态与成纤维细胞相似，增殖 期的4～lO天为对数增长期；人工诱导分化后，第4天左右可见脂质小滴，随分化进程脂 滴逐渐增多，2l天左右大部分分化为成熟脂肪细胞． 2、前脂肪细胞增殖期，在所收集的前脂肪细胞培养液中可检测到低水平的瘦素分泌， 但始终未测到脂联素蛋白分泌。 · 3、前脂肪细胞分化期，瘦素分泌量随诱导分化进程而持续增多，第17天达高峰，之 后保持高水平分泌状态至诱导分化完成．脂联素则在分化诱导到第7天才检测到低水平的 分泌，此时倒置显微镜下已可观察到有内含脂滴的脂肪细胞出现；‘第．17天分泌量达最高 峰；第21天分泌量可见明显下降(PO．05)，而此时胞内脂质含量未降。 结论： 1、成功建立了原代人网膜前脂肪细胞体外培养模型，为进一步研究中心性肥胖及胰 岛素抵抗相关疾病提供了细胞学平台。 2、在原代培养的人网膜脂肪细胞上，瘦素和脂联素呈现不同的分泌