第三章转录精要.ppt

3、RNA的剪接 生物体内内含子的主要类型：GU-AG、AU-AC、Ⅰ类内含子、Ⅱ类内含子 参与RNA剪接的物质： snRNA（核内小分子RNA） snRNP（与snRNA结合的核蛋白） Ⅰ类内含子的自我剪接 Ⅱ类内含子的自我剪接 4、RNA的编辑 编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 C变为U 碱基的突变 尿苷酸的缺失和添加 1986.R.Benne在研究锥虫线粒体mRNA转录加工时发现mRNA的多个编码位置上加入或丢失尿苷酸，1990年在高等动物和病毒中也发现了编辑现象。 锥虫coxII 基因的编辑 核酶 核酶（ribozyme）是指一类具有催化功能的RNA分子通过催化靶点RNA链中的磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物RNA分子，从而阻断基因表达。 核酶的几种特殊结构：锤头状结构、I类内含子结构、二类内含子结构等 Hammer –head Structure 1.锤头结构核酶及作用机制 锤头结构核酶结构特点： 1）由11-13个保守核苷酸组成催化中心。 2）H为切割位点（H为除G外任意核苷酸）。切割部位遵循NUH原则。 3）颈环III可以不是环状结构 锤头结构的五种类型 R表示酶；S表示底物；箭头表示剪切位点 纺锤头结构作用机制 核酶和含有剪切位点的底物共同组成锤头结构，底物部分是切割部位两端的核苷酸，与核酸酶茎I和茎III结合。切割后，该底物被释放。一个新的没有被切割的底物继续结合上去，使切割反应不断重复进行。 2.Ⅰ类内含子结构及剪接作用机制 剪切型核酶 发挥剪切作用 四膜虫rRNA前体加工过程 3. Ⅱ类内含子结构及剪接作用机制 ●RNA的种类与功能 ● 基本概念 ● 原核生物的转录 ● 真核生物的转录 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 Contents 五、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、原核生物mRNA的特征 ● 半衰期短 ● 5’ 端无“帽子”结构， 3’ 端没有或只有较短的poly（A ）结构。 ● 多以多顺反子的形式存在 多顺反子mRNA：能够编码多个蛋白质的一条mRNA。 单顺反子mRNA：只编码一个蛋白质的一条mRNA。 结构基因 Z： β-半乳糖苷酶 Y： 透过酶 A：乙酰基转移酶 Z Y A O P DNA 2、真核生物mRNA的特征 ● 5’ 端存在“帽子”结构 ●多数mRNA 3’ 端具有poly（A ）尾巴（组蛋白除外） ●以单顺反子的形式存在 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 ●RNA的种类与功能 ● 基本概念 ● 原核生物的转录 ● 真核生物的转录 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 Contents 六、RNA合成与DNA合成异同点 相同点： 1、都以DNA链作为模板 2、合成的方向均为5’→3’ 3、聚合反应均是通过核苷酸之间形成的3’,5’-磷酸二酯键，使核苷酸链延长。 不同点： 复制 转录 模板 两条链均复制 模板链转录 （不对称转录） 原料 dNTP NTP 酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 子代双链DNA （半保留复制） mRNA， tRNA， rRNA 配对 A-T；G-C A-U；T-A；G-C 引物 RNA引物 无 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 RNA聚合酶 DNA聚合酶 大小(M) 大，4.8×105dol 小，1.09×105dol 引物 无 有 产物 较短，游离 较长，与模板以氢键相连 作用方式 一条链的某一段 两条链同时进行 外切酶活性 无 5’ 3’，3’ 5’ 校对合成能力 无 有 修复能力 无 有 依赖?因子的终止 ?因子：六聚体蛋白，通过水解核苷三磷酸、DNA\RNA解链，促使新生RNA链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。 转录的基本过程 ●RNA的种类与功能 ● 有关转录的基本概念 ● 原核生物的转录 ● 真核生物的转录 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 Contents 酶 位置 转录产物 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 RNA聚合酶Ⅰ 核仁 45S rRNA前体 加工后 28S 18S 5.8S 不敏感 RNA聚合酶Ⅱ 核质 hnRNA 敏感 RNA聚合酶Ⅲ 核质 5S rRNA、tRNA、snRNA 存在物种特异性 （一）真核RNA聚合酶 三、参与真核生物转录的关键酶与元件 α-鹅膏蕈碱来源与分子式 死帽蕈 α-鹅膏蕈碱分子式 真核生物启动子的结构 核心启动子（core promoter） 上游启动子元件（upstream promoter element，UPE） （二） 真核