乌司他丁通过上ho-1抑制il-4介导的肥大细胞活化.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文乌司他丁通过上调H0．1抑制IL-4介导的肥大细胞活化 前言……………………………………………………O日U舀”…”……………………“““…………………“OOOQO·………·9………‘9 00 材料与方法……0000 000………………………………………………10 结果……………………………………………………………………16 附图……………………………………………………………………19 附表……………………………………………………………………27 OOOOOOOO……···…···…“…………·36 讨{仑·······………………………··O OOO OO0 0……………………………………38 结论………………………OI o OOOO0 00 O 参考文献……………………ol0 0 O……………………………38 综述血红素氧合酶一1及代谢产物生物学功能的研究进展……………40 致{射…………………………………………………………………………48 个人简历……………………………………………………………………49 中文摘要 乌司他丁通过上调HO-1抑制IL_4介导的 肥大细胞活化 摘 要 目的：近期我们研究发现既往主要应用于治疗感染中毒性休克、急性 肺损伤等感染性炎性疾病的药物乌司他丁在卵清蛋白(OVA)诱导的小鼠 变应性炎症模型中具有免疫调节和抗氧化作用，同时还发现其免疫调节、 抗氧化作用与血红素加氧酶(Heme Oxygenase，HO)．1密切相关。 性炎症以中性粒细胞介导为主，而变应性炎症以嗜酸性粒细胞、肥大细胞 等免疫细胞介导为主，二者的作用机制截然不同。因此进一步深入明确 UTI在变应性炎症中的药理作用机制，为其转化为治疗变应性炎症的辅助 用药提供实验室依据。HO．1属于微粒体催化酶，是体内免疫调节和抗氧 化的重要调控因子。前期实验我们发现，乌司他丁在体内实验模型中发挥 免疫调节、抗氧化作用与HO．1密切相关，乌司他丁是否是通过调控HO．1 以及是通过何种信号通路来调控HO．1发挥免疫调节、抗氧化作用的机制 需要在体外细胞实验模型中进一步探讨。 肥大细胞是介导变应性炎症的免疫细胞之一，变应性炎症的病理变化 主要表现为肥大细胞活化脱颗粒，进而释放大量炎性介质。许多研究证明 T111／Th2细胞因子失衡是气道变态反应性炎症疾病发病机制的主要原因 之一。因此实验选取Th2的代表因子IL。4作为刺激因素，它可以刺激B 细胞增殖，从而产生大量的IgE抗体，导致肥大细胞活化。因此，本课题 选用m．4刺激肥大细胞活化，建立体外细胞实验模型对乌司他丁发挥免 疫调节、抗氧化的药理作用机制进行深入探讨。 方法：肥大细胞(P815细胞株，购买自美国)培养于1640培养基中， 其中含有10％新生牛血清，根据实验设计分组：空白对照组(Con组)、IL。4 INF一丫)水平从免疫调节角度验证乌司他丁是否能够抑制IL一4介导的肥大 细胞活化；通过检测活性自由氧(ROS)、蛋白质羟基含量水平、丙二醛 中文摘要 过氧化物酶(GSH．Px)的水平从氧化应激角度验证乌司他丁是否能够调 节IL．4介导的肥大细胞活化引起的氧化／抗氧化失衡；应用血红素加氧酶 (Heme 丁调节HO一1表达的具体机制。 结果： 1 IL．4、UTI的最适干预时间和浓度 通过MTT法及类胰蛋白酶活力实验确定IL．4的最适宜浓度及干预时间