依达拉奉对大鼠原性关节炎的治疗作用及其对滑膜细胞凋亡的影响.pdf

中文摘要 依达拉奉对大鼠胶原性关节炎的治疗作用 及其对滑膜细胞凋亡的影响 摘 要 目的：类风湿关节炎(rheumatoid 性进行性自身免疫性疾病，以对称性、侵蚀性关节滑膜炎为 主要特征，病变呈持续性、反复发作过程。病情逐渐发展可 引起多系统受累并最终导致骨和软骨的破坏及关节功能障 碍。RA的病因及发病机制至今尚未完全阐明，但是大量研 究证实：多种免疫活性细胞的活化，细胞因子、炎症介质的 共同参与，滑膜细胞增殖与凋亡的不平衡及血管翳的形成是 造成疾病发生发展的重要原因。目前，对于RA的治疗，国 内外尚无理想药物。传统抗风湿药物毒副作用较大，疗效差 且疗程长，而生物制剂价格昂贵，还不能被普遍应用。因此， 寻找一种新的治疗药物或治疗方法尤为重要。最新研究表明 滑膜细胞的增殖凋亡不平衡在类风湿关节炎的发生及发展 过程中具有相当重要的地位，并可能成为类风湿治疗的新靶 能有效清除自由基物质，近来研究发现其除了具有明确清除 自由基的作用之外，还发挥着其它多方面效用，包括降低 NF．K B活性和调节凋亡等作用，有日本学者发现它能够缓 解RA患者的关节炎症状，但国内尚无用其治疗RA的报道。 实验即以胶原性关节炎大鼠模型为基础，从关节肿胀度、关 中文摘要 节滑膜组织细胞凋亡情况及NF．KB、凋亡相关基因Fas、 FasL在CIA大鼠关节滑膜中的表达水平几个方面，观察依 达拉奉对CIA的影响，评价其疗效，探讨依达拉奉与NF． KB、滑膜细胞凋亡及其相关基因Fas、FasL四者之间的相 关性及依达拉奉治疗RA的机制和临床应用价值。 组，每组6只，分别命名为I～V组，其中I组为正常对照 组，II组为模型对照组，III组为依达拉奉低剂量组，Ⅳ组为 依达拉奉高剂量组，V组为氯诺昔康组。II～V组每只大鼠 造模致炎后第18天开始III～Ⅳ组分别给予依达拉奉3．O 2／d、6．0 2／d腹腔注射治疗，V组给予氯诺昔 mg／kg mg／kg 1／d腹腔注射治疗。(3)注射后连续观察大鼠的一 康4．0mg／kg 般情况及关节炎症表现，用游标卡尺测定不同时间点各组大 鼠的右足垫厚度，并进行关节炎指数(AI)评定。(4)各组大鼠 于第28天采血处死后取大鼠双膝关节滑膜组织，4％多聚甲 醛固定，石蜡包埋，行苏木素一伊红(HE)染色，光镜下观察 关节滑膜衬里层细胞(LCC)增生，衬里下层炎细胞浸润及血 管翳形成等病理变化。(5)对大鼠滑膜组织进行流式细胞学检 B的SP免 测其细胞凋亡率及Fas，FasL表达水平。(6)NF．K 疫组织化学染色，采用真彩色病理图像分析系统进行定量分 析。(7)应用SPSSl3．0统计软件进行统计分析。 结果：(1)关节炎指数(AI)：第1I组大鼠造模后各时间点 中文摘要 后l 厚度：各组大鼠免疫后12天之内右足垫厚度与第1组相比 无统计学差异，II～V组于免疫后第15天右足垫厚度高于 V组右足垫厚度开始有所下降，21～27天III～V组右足垫厚 异。(3)滑膜组织细胞凋亡率：II组大鼠造模后第28天滑膜 组织细胞凋亡率与I组(正常对照组)相比不具有统计学意义 B的积分光密度 之间无统计学差异(PO．05)。(4)滑膜NF．K III～V组NF．K B的IOD值在造模后28天明显低于II组， B的IOD值高于I组并具有 差异(PO．05)，ⅡI～V组NF．K 鼠造模后第28天滑膜组织FasL表达低于I组(正常对照组) 相关性分析：AI与右足垫厚度之间呈直线正相关；滑膜细胞 中文摘要 凋亡率与AI之间呈负相关，滑膜组织FasL表达与凋亡率呈 正相关；滑膜组织NF．K B的I