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姜黄素对人肾癌胞786-o的体外作用及其机制研究
中文摘要
姜黄素对人肾癌细胞786.0的体外作用
及其机制研究
摘 要
目的:
生长的体外作用及其相关机制,同时观察姜黄素联合索拉非
尼(sorafenib,BAY
的体外作用。
方法:实验细胞分为4组:空白对照组、索拉非尼单药
组、姜黄素单药组、姜黄素联合索拉非尼组。索拉非尼和姜
黄素单独或联合作用于细胞,以四甲基偶氮唑蓝
ium—based
colorimetric
(terzol assay,MTT)比色法检测
定吸光度oD值。流式细胞仪测定姜黄素对786—0细胞周期
分布和凋亡的影响,光学显微镜,观察细胞形态学改变,电
子显微镜下观察细胞超微结构变化,免疫组化法检测姜黄素
表达水平的影响。
结果:1.姜黄素、索拉非尼两单药对人肾癌细胞786.0
增殖的抑制作用。MTT比色法显示姜黄素、索拉非尼两单药
对人。肾癌786.0细胞的生长均有明显的抑制作用。不同浓度
姜黄素、索拉非尼处理24,一--72h后,与对照组相比,各处理
组0D值均有不同程度下降,差异有显著性(PO.05)。各处
理组间比较,亦具有显著性差异(PO.05)。且随药物处理浓
度的增大、作用时间的延长,0D值逐渐下降,即姜黄素、索
中文摘要
拉非尼对786.O细胞的增殖抑制作用有明显的剂量一效应和
2.MTT比色法分析姜黄素联合索拉非尼对786.O细胞的增
72h后的抑制率显著高于单用索拉非尼、姜黄素组(PO.05),
两者呈现出相加的抗瘤效果。单用索拉非尼的IC如为
7.7.5.1肛mol/L,联合12.59mol/L姜黄素后可将索拉非尼的
结论:在一定浓度范围内,姜黄素可加强索拉非尼对786一O
细胞的增殖抑制作用。3.光镜下,姜黄素25pJnol/L作用
786.O细胞48h后,有明显的细胞形态学改变:即细胞缩小、
变圆。随姜黄素浓度的增大和作用时间延长,细胞开始破裂,
有的细胞胞浆中出现空泡,有的培养液中可见到大量细胞碎
片。在透射电镜观察可见胞核局部向外呈锐角突起,核染色
质高度浓缩,电子密度增高,边集于核膜下,形成沿核膜收
缩的新月状体。4.流式细胞仪检测786.O细胞周期分布和凋
细胞48h后,随药物浓度的增大,G0/G】期细胞逐渐增多;S
期和G2/M期细胞则逐渐减少。即姜黄素可阻滞786.O细胞
周期进程于Gl期,该作用呈剂量.效应依赖关系。1
2.5pmol/L、
现典型的亚二倍体凋亡峰,依姜黄素浓度增大而逐渐升高;
中文摘要
凋亡百分率分别为:
相比差异具有显著性统计学意义(PO.05)。5.免疫组化结果
的蛋白表达均减弱,Caspase.3的蛋白表达增强,与对照组
相比差异具有显著性(P0.05)。
结论:1.本研究首次通过体外实验证实了多靶向的天然
药物姜黄素具有明显的抗肾癌细胞786.O的作用,为肾癌的
治疗提供了新的理论基础。2.本实验证实索拉非尼与姜黄素
均具有明显的抑制人肾癌细胞786.O的作用,且此作用均呈
明显时间一剂量依赖关系。3.本实验证实姜黄素可协同索拉非
尼对人肾癌786一O细胞的增殖抑制作用。4.本实验证实姜黄
素可阻滞入肾癌细胞786.O于G,期并可诱导该细胞凋亡。
5.我们初步推论姜黄素通过上调Caspase.3蛋白的表达,下调
增殖、诱导该细胞凋亡的作用。6.本实验证实了姜黄素这一
天然多靶向的药物具有抑制肾癌细胞增殖的作用,并通过姜
黄素联合索拉非尼的研究丰富了肾癌的治疗。
关键词:索拉非尼;姜黄;肾癌;增殖;凋亡;786.O
英文摘要
of
EffectsCurcuminonHumanRenalCell
Carcinoma786..0CellsInVitroand
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