重组il-24白抑制胃癌生长及其作用机制的实验研究.pdf

重组IL-24蛋白抑制胃癌生长及其作用机制的实验研究 中文摘要 重组IL_24蛋白抑制胃癌生长及其作用机制的实验研究 中文摘要 目的： 机理。 方法： 然后测定ClIO培养上清中的rhIL-．24的生物学活性。同时以苏州大学医学院细胞和分 n 提后转化BL-21菌株，挑取阳性克隆。振荡培养过夜．接种LA培养基，37C气浴摇 离心取菌体，经反复超声破碎，将包涵体进行洗涤，溶包，复性后透析，获得部分纯 I 重组IL-24蛋白抑制胃癌生长及其作用机翻的实验研究 中文摘要 106)sGc790l胃癌细胞注射于裸鼠腋部外侧皮下，建立人胃癌裸鼠移植瘤模型，待肿 顺铂和PBS，三天一次，每次注射前称重及测量肿瘤大小。注射五次后处死所有裸鼠， 取出肿瘤称重、计算抑制瘤体积和抑瘤率，免疫组化法测定移植瘤中BAX、BCL-2、 CD34、VEGF等的表达。 结果： 酶切和PCR鉴定后提示表达质粒构建正确。我们获得了全长的hIL-24基因片段，与 胞出现G2／M阻滞，并出现明显凋亡峰。rhIL-24刺激PMBC49h后，m-6、TNF．q、 IFN-Y的表达水平显著升高，至72h分泌达到高峰，与对照组相比，差异具有显著性 素(阳性对照)一样均可显著抑制微血管形成。其中对二级和三级血管的抑制效果明 胞裸鼠移植瘤模型．腋下注射SGC-汀901细胞7．10天后各组裸鼠均可成瘤，成瘤率为 组BAX的表达均明显高于PBS组，差异具有显著性(po．001)。 结论： 1、成功构建了真核表达载体和原核表达载体，并在CHO细胞中获稳定表达，在 大肠杆菌中获得高效表达。 Ⅱ 茎丝!!坐里皇塑型里堡生篓垦墨堡星塾塑塑壅墅里塞 ±苎垫墨 2、CHO上清和大肠杆菌中表达的rlKL-24蛋白均具有抑制胃癌细胞生长，刺激 PMBC分泌lL-6、TNF—d、ⅢN_Y等细胞因子的作用。 胚尿囊膜的微血管形成有明显的抑制作用。 VEGF、CD34的表达明显降低，BAX的表达明显增高。 具有抑制作用。 作 者：严苏 指导老师；杨吉成 Ill 重组IL-24蛋白抑制胃癌生长及其作用机制的实验研究 英文摘要 The ofthe of cancermechanism study anti-gastric rhIL-24in vitroandvivo Abstract Objective： Withtheeukaryotic vector andthe expressionpcDNA3．O-hIL-24prokaryotic vector makethemWansfectCHOcellsandBL-21 expressionpET-21a(+)-hIL-24，we and in them．Thenassossthebioactivef