三羟异黄酮抑制肝癌细胞smmc-7721增殖及其机制的研究.pdf

中文摘要 三羟异黄酮抑制人肝癌细胞SMMC．7721 增殖及其机制的研究 摘 要 肝癌是严重危害我国人民生命健康的恶性肿瘤之一。据 统计全世界每年约43．7万人死于肝癌，其中约50％发生在 我国。临床上多数肝癌经诊断时已属晚期，而目前主要的化 疗药物均为细胞毒药物，毒副反应大，人体耐受性差，且疗 效差，对改善预后无显著突破。因此研究非细胞毒的抗癌药 物，抑制癌细胞的增殖，减少其复发，提高肝癌患者的生存 率和生活质量，已成为医学工作者义不容辞的任务。从天然 的动植物质中寻找毒性低、疗效较高的抗癌活性成分，已成 为近年来国内外研究的热点。 三羟异黄酮是一种纯化于豆制品的天然黄酮类化合物， 是高效无毒的抗癌成份。它作为～种蛋白酪氨酸激酶抑制剂 和植物雌激素，在许多肿瘤例如：乳癌、前列腺癌、胃癌、 结肠癌的发生发展中发挥多重抑癌效应。目前认为其可能的 抑癌机理包括：①抑制酪氨酸蛋白激酶(Proteintyrosine 传导通路，使癌细胞增殖受抑。②弱雌激素作用：可通过与 体内雌激素受体结合，并可增加细胞内性激素结合球蛋白的 合成，抑制乳腺癌和前列腺癌等性激素依赖性肿瘤细胞的增 殖活性；③抑制拓扑酶Il活性。④可诱导肿瘤细胞凋亡。⑤ 抑制肿瘤组织中新生血管的生成。⑥通过抑制存活信号转导 通路增加肿瘤对放疗的敏感性等。⑦抑制肿瘤组织的侵润转 中文摘要 移能力。⑧抗氧化作用和抑制过氧化氢的形成。 细胞增殖失控是恶性肿瘤无限制增殖的重要原因。 c．mvc基因编码产物是参与细胞周期调控最重要的转录因 子，控制着多种基因的表达和转录，可对细胞的生长和增殖 进行调控。c．myc的过度表达和异常扩增可导致细胞的无限 增殖，研究已发现在人的肺癌、胃癌、结肠癌、肝癌等多种 恶性肿瘤细胞中均有c。mvc的异常表达和扩增。端粒酶是一 种特殊的逆转录核糖核蛋白酶，在细胞永生化和恶性肿瘤 发生发展中起着重要作用。它以自身的RNA为模板，合成端 粒DNA片断并加到染色体末端而维持端粒的长度和染色体 的稳定，从而使肿瘤细胞得以无限分裂增殖。端粒酶由端粒 酶RNA Telomerase fHuman RNA，hTR)、端粒酶蛋白 TelomeraseAssociated Protein (Human 1，hTPll、端粒酶逆 telomerasereverse 转录酶(Human 个部分组成。其中hTERT对端粒酶活性表达最为关键，它 是肿瘤细胞获得无限增殖能力的关键因素。许多研究已证实， hTERT活性上调是端粒酶激活的重要途径，也可能成为肿 瘤治疗的一个理想靶点。 近年来研究发现，三羟异黄酮具有抑制恶性肿瘤细胞增 殖的作用，且三羟异黄酮对癌细胞增殖的抑制作用随剂量 增加和作用时间延长呈正相关性。动物实验研究发现，三羟 异黄酮能抑制二甲基苯葸诱导的大鼠乳腺癌发生及体外 MCF7乳癌细胞的增殖。进一步研究证实，三羟异黄酮能明 P27、PCNA等多种细胞因子表达改变。但目前其具体的作 用靶点和分子机制尚未完全阐明。 中文摘要 目前国内外关于三羟异黄酮抑制恶性肿瘤增殖的研究 尚局限在前列腺癌、乳癌等性激素依赖性肿瘤方面，针对人 肝癌细胞生长增殖的研究尚少，且机制未明。因此有必要在 未来研究中观察不同浓度的三羟异黄酮对人肝癌细胞的增 殖的影响，以揭示其作用机制。本研究通过体外人肝癌细胞 株SMMC．7721培养，观察三羟异黄酮对人肝癌细胞 SMMC．7721增殖相关蛋白与基因的表达的影响，旨在探讨 三羟异黄酮抑制人肝癌细胞增殖的作用及其分子机制。 目的：探讨三羟异黄酮抑制人肝癌细胞增殖及其分子 机制。 方法：应用体外人肝癌细胞系SMMC一7721细胞培养技 术，观察三羟异黄酮对肝癌细胞的增殖抑制作用，绘制人肝 癌细胞株SMMC．7721生长曲线并计算细胞倍增时间，选择 合适的实验剂量。