吉非替尼对肺癌胞a549、h1975放射敏感性的影响及机制研究.pdfVIP

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 吉 非 替 尼 对 肺 癌 细 胞 A 5 4 9 、 H 1 9 7 5 放 射 敏 感 性 的 影 响 及 机 制 研 究 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心 硕士研究生 曹喆 导 师 陈元教授 中 文 摘 要 目的：联合应用表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂-吉非替尼(Gefitinib)和放射线 作用 EGFR 不同状态的 NSCLC 细胞 A549 、H1975 ，观察该药对两种细胞放射 敏感性、DSB 修复情况的影响及其 EGFR 是否均在 X 线照射后入核 方法：1)克隆形成实验检测各组细胞α、β和 SF2 等值；2)免疫荧光显示放疗 后不同时间点各组细胞核中磷酸化 γ-H2AX 的表达，分析 DSB 修复情况；3)免疫 印记检测各组细胞不同时间点细胞核内外EGFR表达水平。 结果：1) 加药组 A549 细胞 SF2 值为 0.355 低于对照组 0.4443；加药组 H1975 细胞和对照组 SF2 值分别为 0.3094 和 0.3207，无明显差异；2) A549 细胞加药 组比对照组各时间点γ-H2AX 表达明显增高（T 表示加药组均数±标准差，t 表 示对照组均数±标准差；T30min=22.33±2.30,t30min=14.18±2.61;T45min=15.95± 2.40,t45min=11.40±1.75;T60min=11.47±1.19,t60min=4.40±0.58; P0.05）；H1975 细 胞 则 无 差 异 （ T30min=22.07 ± 0.56,t30min=21.59 ± 1.52;T45min=15.97 ± 0.90,t45min=15.63±0.93;T60min=11.39±0.39,t60min=10.83±1.29; P 0.05）；3)加 药 组 A549 细 胞 比 未 加 药 组 胞 浆 EGFR 表 达 明 显 增 加 （ T =18.1 ± 0min 0.306,t =12.3 ± 0.557;T =18.2 ± 0.306,t =11.1 ± 0.379;T =16.2 ± 0min 15min 15min 30min 0.551,t30min=7.37±0.451;T60min=15.5±0.265,t60min=4.53±0.379; P 0.05），胞 核内 EGFR 显著减少（ T15min=0.51±0.050,t15min=4.93±0.321;T30min=1.03± 1 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 0.115,t30min=5.20±0.361;T60min=0.81±0.025,t60min=5.70±0.458; P 0.05）；加 药组 H1975 细胞和未加药组细胞照射后胞核内没有 EGFR 表达，且胞浆内 EGFR 表达水平两组细胞无明显差别（T =1.80±0.042,t =1.73±0.07;T =1.76 0min 0min 15min ±0.043,t15min=1.51±0.040;T30min=1.68±0.040,t30min=1.75±0.051;T60min=1.70± 0.021,t60min=1.65±0.036; P 0.05）。 结论：吉非替尼能增加非小细胞肺癌 A549 放射敏感性，可能与吉非替