新型吡唑啉酮衍物抗肿瘤作用及机制研究.pdfVIP

新型毗哗琳酮衍生物抗肿瘤作用及机制研究 中文摘要 新型吡哟闻衍生物抗肿瘤作用及机带啊聘电 博士研究生： 王晓红 导 师： 符立梧教授 专 业： 肿瘤学 摘要 l研究背景 癌症具有较高的发病率和致死率。严重威胁着人类的健康和生命。目前，化 疗仍然是肿瘤治疗的主要手段之一，因此新药的开发研究也依然是攻克肿瘤的重 要途径之一。目前，抗癌新药的开发对象主要包括天然物质、化学合成物质及生 物技术合成物质等，而且开发一种新型的抗癌药物也是解决临床上多药耐药 (multidrugresistanc圮。MDR)的途径之一． MDR是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性的同时，对结构和作用机 制不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性，是导致化疗失败的主要原因之一．目前研 因之一．实际上，P．gP是一种存在于细胞膜上的ATP依赖性药物外排泵，它可 以将抗癌药物由胞浆或直接从细胞膜排出细胞外，导致肿瘤细胞内抗癌药物积累 specificproteinase， 的减少．天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cysteiny!鹅pan嫩e Caspases)家族在介导细胞凋亡过程中扮演着重要的角色，有报道P．gp能抑制 因此，P一印在 Caspase一8的激活，进而抑制Caspase-3的激活来抵抗细胞凋亡。 调节细胞死亡过程中可能扮演药物外摊泵和抑制死亡受体途径的双重作用。 诱导细胞凋亡是大多数抗肿瘤药物的作用机制之一，目前死亡受体途径和线 粒体凋亡途径是公认的两条经典凋亡途径。前者通过配体FasL或TNF与死亡受 体Fas或TNFR结合使受体形成三聚体，继而结合一种Fas相关死亡结构域 death (Fas．associated 新型吡哗啉酮衍生物抗肿瘤作用及机制研究 中文摘要 合物(death-inducingsignaling 受到应激，细胞毒或化疗药物作用时，细胞线粒体功能紊乱导致线粒体膜电位 membrane (mitochondrial potential，A activation Cyto-c)入胞浆，在凋亡相关因子一l(apoptoticprotease factor,Apaf-1) Caspases激活的两种典型途径。此外，细胞凋亡常常受到一系列细胞内相关蛋 白及信号通路的调控，因此，调控细胞凋亡过程中相关蛋白的表达也能够调节细 胞凋亡的发生。 目前，化学合成的抗癌药物的研究主要是对已知有效结构进行改造的基础上 开发一些高效、低毒、抗癌活性广谱的衍生物。吡唑啉酮衍生物是一类化学合成 的物质，因具有易合成及生物学活性丰富的优点受到广泛的关注。已有报道吡唑 啉酮衍生物具有抗微生物、抗病毒及抗肿瘤等活性。近年来，在寻找新型化学结 构抗癌药物的过程中，毗唑啉酮衍生物作为一种潜在的抗癌物质受到了关注。有 报道吡唑啉酮类化合物在体外对HL．60及人类肺癌细胞具有明显的细胞毒性。 尽管存在吡唑啉酮化合物抗肿瘤活性的相关报道，但此类化合物对人口底癌KB 细胞及其MDR KBv200细胞的体内外抗增殖活性及抗肿瘤的分子机制仍不清 楚。 本研究对一系列吡唑啉酮衍生物(Lgf-YL)在四种人类肿瘤细胞HepG2、 癌KB细胞及其MDRKBv200细胞的体内外抗增殖活性及分子机制进行研究。 2方法 采用MTT法对13种吡唑啉酮衍生物进行细胞毒测定及体外筛选：裸鼠移植 荧光显微镜下观察凋亡细胞形态；DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNAladder及药物 与DNA反应测定；Annexin V-PI双染法分析细胞凋亡率；流式细胞仪检测△1l， 新型毗畦啉酮衔生物抗肿瘤作用及