普通裂褶菌形态观察及小鼠体内药物敏感性实验研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文普通裂褶菌形态学观察及小鼠体内药物敏感性实验研究 前言···…·····一“”一”………···…”一”……………一·…”一“”····…8刖舀”“”“一““一””一“””””一””一””“”””””“””一”““”””“8 材料与方法……………………………………………………………9 结果··················…······…···········…····················…···········13 附图······································…·············……··················16 附表……………………………………………………………………28 讨论··················…·······································-·················29 结论····················································…····················…3l 参考文献………………………………………………………………32 综述 普通裂褶菌感染的I临床及实验室研究现状…………………34 致谢······································…···············…·················……··52 个人简历……………………………………………………………………53 中文摘要 普通裂褶菌形态学观察及小鼠体内药物敏感性实验研究 摘 要 目的：普通裂褶菌(．鼢却办)，批m∞朋肌“刀P)属真菌门，担子菌 纲，伞菌目，裂褶菌科，裂褶菌属，广泛分布于自然界，多在春至秋季 节生长，属于木腐生菌，野生于阔叶树及针叶树的枯枝倒木上，有的 也发生在枯死的禾本科植物、竹类或野草上。在对人类致病方面，临 床以吸入其孢子引起过敏反应比较常见，近年来临床上由普通裂褶菌感 染引起人类和犬齿动物．狗深部组织真菌病的病例报道日渐增多，自 关该菌感染引起体表或深部组织真菌病的病例报道近50例。普通裂褶菌 作为一种潜在的条件致病菌日益受到临床及实验室的重视。本研究所用 菌株分离自1例心脏搭桥术后患变应性支气管肺真菌病(ABPM)的患 者的痰液，经中国科学院微生物研究所鉴定为．鼢汤础)，砌聊∞班聊“刀口。 本研究一方面通过对普通裂褶菌形态学观察，为临床上诊断普通裂 褶菌感染提供实验室依据；另一方面，采用动物实验的方法，建立系统 性普通裂褶菌感染小鼠模型，应用氟康唑、伊曲康唑、特比萘芬三种常 用抗真菌药物治疗系统性普通裂褶菌感染小鼠，通过对实验小鼠中位生 存时间和生存率以及小鼠内脏(心、肝、脾、肺、肾)组织的真菌逆培养 阳性率和肝脏组织载菌量的检测来评价它们在小鼠体内抗普通裂褶菌活 性，为l瞄床上治疗系统性普通裂褶菌感染提供依据。 方法： 1形态学观察 1．1菌落大体形态学观察将我科保存菌株常温复苏3天，接种于含氯霉 素的沙堡氏琼脂培养基(SDA)上，置于27℃和37℃恒温箱交替光照环 境下培养4周，观察菌落生长情况。 1．2小培养(方块法)将普通裂褶菌点种于含氯霉素的沙堡氏琼脂培养 况。 中文摘要 1．3光镜观察取其菌丝标本置于载玻片上，lO％KoH溶液溶解后，盖 上盖玻片，光镜下观察菌丝形态。 2小鼠体内药敏试验 2．1系统性普通裂褶菌感染动物模型的制作将我科保存菌株复苏，转种 于SDA培养基上37℃培养7天。用无菌生理盐水制备成菌悬液，接种 于小鼠体内使其感染，解剖小鼠分离出恢复毒力的菌株。分离出的菌株 用无菌生理盐水制成菌悬液，通过腹腔注射途径接种于应用环磷酰胺免 疫抑制的小鼠。 2．2给药方法接种后第二天开始给药，氟康唑、伊曲康唑、特比萘芬的 次，连续5天。 2．3生存观察连续观察各组小鼠感染该菌后21天内的自然死亡情况，记 录死亡日期和死亡只数。 2．4组织真菌逆培养无菌条件下将各脏器用组织研磨器研碎后挑取少许 分别接种于含氯霉素的沙堡氏琼脂平皿培