实验性糖尿病大肾脏色素上皮衍生因子和转化生长因子βlt;,1gt;的表达及罗格列酮的干预作用.pdf

中文摘要 实验性糖尿病大鼠肾脏色素上皮衍生因子和转化生 长因子13，的表达及罗格列酮的干预作用 摘 要 目的：糖尿病肾病(diabetic 病(diabetes mellitus，DM)重要的慢性微血管并发症之一， Matrix，ECM)增生为病理特征，导致。肾小球的高滤过和蛋白 尿，是引起终末期肾衰的重要原因。肾小球实质细胞，尤其 是系膜细胞可分泌和表达多种细胞因子，其中转化生长因子 (transforminggrowth (vascularendothelial growth 的关键因子。TGF．13。是ECM的调节剂，其过度表达可导致 ECM积聚；刺激足突细胞分泌VEGF。色素上皮衍生因子 (pigmentepithelium．dedved 抑制剂家族，最早由胎儿视网膜色素上皮细胞的培养液中分 离出来，是最有效的新生血管抑制剂。PEDF和VEGF的平 衡表达是维持眼内血管系统稳态的重要因素。PEDF与体内 多个器官功能有关，最近国外一项研究显示，DM大鼠。肾脏 的皮质和髓质中PEDF都显著下降，肾小球系膜细胞培养显 生密切相关的因子。罗格列酮是噻唑烷二酮类(TzDs)药物 中的一种，它通过减轻胰岛素抵抗，增强胰岛素敏感性来降 低血糖；改善。肾小球高滤过状态，调节系膜细胞及’肾小管上 皮细胞增殖、分化，减少炎症因子产生，纠正脂代谢紊乱， 中文摘要 从而发挥肾脏保护作用。除上述作用外，它还有血管保护和 抗炎作用。多项国内外临床及基础实验均显示，TZDs可下 调肾脏TGF．Dl水平，还可以减少VEGF的表达并呈剂量依 赖性，这就是其抗炎和血管保护作用的具体体现。由于PEDF 在DM大鼠肾脏的异常表达及其在眼部疾病中与VEGF的密 切关系，还有最新发现的其抑制TGF．13。表达的作用，推测 表达，从而改善肾小球高滤过状态，减少ECM堆积，对DM 大鼠的。|!子脏起到保护作用。因此，本研究通过腹腔～次性注 型糖尿病大鼠模型，该模型与人类l型DM的病理过程和代 谢特点相似，并给予干预组罗格列酮治疗，在此基础上观察 PEDF和TGF．B，在正常大鼠与糖尿病大鼠肾脏表达的变化 及罗格列酮的干预作用，从而进一步研究糖尿病肾病的发病 机制和罗格列酮对糖尿病的肾脏保护作用。 方法： l选择雄性SD大鼠42只，给予标准大鼠饲料适应性喂 养l周后，从中随机抽取14只作为正常对照组(NC组)， 其余作为模型组(MO组)。后者给予腹腔一次性注射大剂量 于16．7mmol／L者作为l型糖尿病大鼠模型。再把成模大鼠 随机分为糖尿病对照组(DM组)、糖尿病罗格列酮干预组 (RSG组)。RSG组于成模后第2天开始给予罗格列酮钠(5 mg／kg．d)混悬液灌胃，另外两组予以等体积生理盐水灌胃。 实验全程共持续12周，于造模前、造模72小时及实验结束 中文摘要 前尾静脉取血测空腹血糖(FBG)；实验结束前测体重，并 用代谢笼收集24小时尿液，放射免疫分析法测定24小时尿 白蛋白排泄量(UAE)；于第12周末，股动脉放血处死动物， 收集血液，测定血清甘油三酯(TTG)、总胆固醇(TC)、低密 度脂蛋白．胆固醇(LDL-C)、极低密度脂蛋白．胆固醇 谷丙转氨酶(ALT)；酶联免疫分析法测定血清PEDF的浓度； 摘取双侧肾脏称重，分别进行病理学HE染色观察肾脏形态 学变化，免疫荧光染色观察PEDF和TGF．13，的表达部位及强 度：免疫组化的方法检测肾脏PEDF和TGF—B1的蛋白表达情 尿病大鼠、罗格列酮干预组和正常大鼠肾脏皮质的表达水 平。 2统计学分析：所有资料以SPSSl2．0统计软件进行分 析，首先用描述性统计和分析研究变量分布，符合正态分布 的测定值以(i士s)表示，两组问的比较采用t检验，多组间的 比较采用方差分析。 结果： 两组大鼠FBG相比较无显著性差异(P=0．52)。 2．12周末实验结束时，DM组大鼠肾重、肾重／体重较 重、肾重／体重较NC组增加，但较DM组降低，差异具有显 著性(P均0．05)。 中文摘要 P0．05，P0．01)。 白