实验性大鼠脑缺再灌注后脑组织aqp-4表达的动态变化及意义.pdfVIP

中文摘要 实验性大鼠脑缺血再灌注后脑组织AQP．4表达的动 态变化及意义 摘 要 vascular 目的：脑血管病(Cerebral 经科最常见的疾病，也是严重危害人类健康的三大疾病之 一。临床上将脑血管病分为缺血性脑血管病和出血性脑血管 病两大类，其中又以缺血性脑血管病多见，占CVD的 59．2％～85％。缺血再灌注是临床上缺血性损伤过程中常见的 病理生理过程，无论是血管的自然再通，还是临床医师给予 的溶栓、抗凝、扩张血管等治疗造成的医源性血管再通，缺 血再灌注的发生率都很高。病理生理学研究显示：脑水肿是 脑缺血再灌注时最显著的组织学变化之一，且脑水肿见于许 多中枢神经系统疾病，甚至一些其他系统疾病、全身性疾病 均会发生脑水肿。尽管目前在脑水肿的发生机制、预防和治 宁方面已取得了一些进展，但目前针对脑水肿的治疗多以对 症处理为主，尚缺乏针对水肿形成机制加以纠正和改善的方 法，因而成为临床和基础研究的热点。水孔蛋白(aquaporin， channel AQP)，又称水通道蛋白(water protein)，是一组与 水跨膜转运有关的蛋白质。AQP-4是水孔蛋自家族成员之 一，仅对水分子有通透性，在脑组织中广泛存在并表达于血 Brain 脑屏障(BloodBarrier，BBB)处的星形胶质细胞膜， 以及与脑脊液(CSF)接触的软脑膜及室管膜表面。大量研 究表明AQP．4在脑外伤、感染、肿瘤、卒中等中枢神经系统 疾病引起的脑水肿中起关键作用。目前AQP一4与脑水肿关系 中文摘要 的研究倍受关注，但迄今为止，有关脑缺血再灌注后AQP．4 表达与脑水肿关系的研究国内外均较少。本实验旨在通过建 立稳定的大鼠脑缺血再灌注模型，并在此基础上进行行为学 评分，脑组织含水量测定，观察AQP．4在脑组织的细胞定位 和动态表达，进而探讨AQP．4在缺血再灌注损伤过程中的作 用和意义。 等的线栓法并加以改良，建立大鼠脑缺血再灌注动物模型。 假手术组大鼠只分离血管不插线。在模型成功后6h、24h、 48h、72h、7 d分别对大鼠进行行为学评分，包括Longa评 Score)、 Score)、平衡木评分法(Beam 分法(Longa Walking Berderson评分法(BerdersonScore)。评分后将大鼠断头处 死取脑，弃去双侧嗅球及额前部4mm，剩余脑组织前部约3 mm厚的脑片沿中线切开，分别称取左右两侧湿重(Wet Weight，DW)，计算各时间点的脑组织含水量，计算公式为： 约2mm，固定后石蜡包埋，制成石蜡切片，进行常规HE 染色，观察大鼠脑组织缺血灶及周围的水肿情况、神经元和 胶质细胞的改变，并与病变对侧进行比较；相邻组织切片进 行免疫组织化学染色，观察AQP．4在脑组织的细胞定位和动 态表达。 结果：大鼠在术后不同时间点出现不同程度的行为学异 常，其中术后6h与对照组相比无统计学差异，考虑为麻醉 h～72 和手术创伤所致。再灌注组术后24 h行为学评分与对 h和72 照组相比有显著意义，P0．05；其中以48 h的行为 中文摘要 学异常为著；7d时无明显行为学异常，行为学评分与对照 组相比无统计学差异，P0．05。术后6h再灌注组与对照组 脑组织含水量无显著性差异，P0．05。再灌注组24h脑含水