他汀类药物调脂效果和CETP基因常见单核苷酸多态的相关性的研究.pdfVIP

他汀类药物调脂效果与CETP基因常见单核苷酸多态的 相关性研究 中文摘要 【目的】 本课题采用包括收集经临床确诊的粤西地区汉族人群中高脂血症患者外周 estertmsfer 血标本、生物信息学方法搜寻胆固醇酯转运蛋白(choleSter)rl protein， nucleotide CETP)基因中常见单核苷酸多态(single 分析检测数据、结合师兄李俊涛的研究结果，运用遗传学分析软件SHEsis对启 动子区和内含子l中的不同多态性位点进行连锁不平衡和单倍型分析等方法，筛 查粤西地区汉族人群中CETP基因内可能与他汀类药物调脂效果相关的功能性 SNPs以及单倍型，为临床上合理用药提供一些参考依据。 【方法】 1．按照纳入和排除标准，收集粤西地区汉族人群中高脂血症患者外周血标本 233例，5ml／例。收集上述病例调脂治疗前的全套血脂检测结果以及其他有关临 床资料和他汀类药物调脂治疗4周后(辛伐他汀，20mg／day)的全套血脂检测结 果。 2．搜索NCBI数据库SNP TaqIB、1696G／A)的DNA序列资料。 3．设计并合成4对扩增含这4个SNPs的DNA片段时所需的引物。 4．PCR扩增CETP基因中包含这4个SNPs的DNA片段。 5．限制性内切酶谱检测PCR扩增片段中的sNPs，计算基因频率和基因型频 率。 6．SPSS统计学软件分析各SNPs与各血脂指标的相关性，筛查粤西汉族人 群中CETP基因内与他汀类药物调脂效果相关的SNPs。 7．运用SHEsis遗传学分析软件对CETP基因的不同多态位点进行连锁不平 衡及单倍型分析并初步探讨单倍型与他汀类药物疗效之间的关系。 【结果】 的危险性较低。 2．高脂血症患者TC基线水平在1405V多态不同基因型的3组间均有显著 性差异，II基因型个体的TC水平比IV+VV基因型个体高。调整年龄、性别、 吸烟、体质量系数等混杂因素的影响作用后，TC基线水平的差异仍然存在。而 较高TC水平被认为是致动脉粥样硬化的主要危险因素之一，提示II基因型个体 发生心血管疾病的危险性可能高于其他两种基因型的个体。 多态位点不同基因型3组问差异均有显著性意义(庐20．17，P0．00l；庐31．10， P0．00l： 下降幅度大，调整混杂因素后该差异仍然存在。 态位点不同基因型3组问的差异也存在显著性意义(户14．05，尸0．00l；庐3．485， 尸=O．032： 约0．09 mmol／L(尸=0．038)，O．15 B282型高约0．17 mmol／L(尸毫0．045)，可见B1等位基 因携带者对他汀类药物的治疗较敏感。 5．辛伐他汀治疗4周后血脂水平的改变，在A373P多态的各基因型中，在 调整混杂因素的影响后只有HDL．C(P=0．001)的变化量的差异有统计学意义， 但由于突变型个体较少而缺乏实际意义；在1696G／A多态的各基因型中，在调 整混杂因素的影响后各血脂指标的变化量的差异没有统计学意义；提示这两个多 态位点同辛伐他汀调脂效果并无关联。 6．结合师兄李俊涛的研究结果，对CETP基因启动子区以及内含子l区的 衡分析显示，四者两两之间均存在连锁不平衡。 2 种单倍型频率之和占总体的72．1％，其中H13(1111)所占比例最大，这四个多态位 点中的一个或两个突变的患者占到总体的65％左右。 【结论】 1．在粤西地区的高脂血症患者中，CETP基因1405V多态位点不同基因型 的患者对他汀类药物的敏感度不同。II基因型患者的血脂指标下降幅度比Ⅳ+VV 型大，因此提示临床医生II基因型患者更适合用他汀类药物治疗高脂血症。 2．CETP基因TaqIB多态可能也是影响粤西地区高脂血症患者他汀类药物 调脂效果个体化差异的重要因素之一，Bl等位基因携带者对他汀类药物的治疗 较敏感，这可为临床合理用药提供参考。 的影响