毕业论文答辩固定化酶祥解.ppt

1 课题研究的意义 2 固定化酶的定义及特点 3 固定化酶载体材料 3.1有机高分子载体材料 3.2无机载体材料 3.3复合载体材料 4 固定化酶的方法 4.1固定化酶传统制定方法 4.2改进酶的固定化进展 4.3固定化新型载体的研究改变 5固定化酶在食品工业中的应用 5.1固定化酶在柑橘汁加工中脱苦的应用 5.2固定化果胶酶在果汁加工中澄清的应用 5.3固定化酶在啤酒澄清中的应用 5.4固定化酶在乳制品中的应用固定化酶在制糖中的应用 5.5固定化酶在制糖中的应用 5.6固定化酶在茶叶加工中的应用 结论 致谢 1 课题研究的意义 固定化酶是酶工程的核心技术之一，有利于实验酶的重复使用及产物与酶的分离，将酶工程提高到一个新的水平，极大地促进了酶工程的研究与应用，并广泛应用于各个领域。特别在食品果汁、酒生产、乳制品业等其他方面的应用意义重大，促进了现代食品生产工业多方面的发展，将来对它的研究利用必将更广泛，而且因为其节省能源与资源、减少污染的生态环境效应而符合可持续发展的战略要求发展前景极其美好广阔。 2 固定化酶的定义及特点 固定化酶技术是将酶用人工方法固定在特定载体上或一定空间范围内，进行催化、生产，并能反复和连续使用的酶。因而固定化酶一般可以被认为是水不溶性酶。与水溶性酶相比，它有自己的固有优势，但也存在一定的缺点。 固定化酶的优缺点 优点 缺点 ( a ) 易于将固定化酶与底物、产物分开，方便后续的分离和纯化； ( b ) 可以增加产物的收率,提高产物量； ( c）可以在较长时间内连续生产； ( d ) 酶反应条件容易控制； ( e ) 较水溶性酶更适合于多酶反应； ( f ) 酶的使用效率高，使用成本低 ( g ) 适于产业化、连续化、自动化生产。 ( a )在固定化过程中，酶活力会损失; ( b ) 工厂初期投资大，只能用于水溶性底物，适合于小分子，不适宜于多酶反应; ( c）还需要辅助因子的协助才可以有效反应。这些协助因子常是有毒性的化学试剂，若残留于食品中对人体有很大的影响。 3 固定化酶的载体材料 3.1 有机高分子载体 有机高分子载体有二类。一类是天然高分子载体材料。此类材料一般无毒性，传质好，但强度较低，在厌氧条件下易被微生物分解，寿命短。常见琼脂、海藻酸钠等。 另一类是合成有机高分子载体材料。一般来说强度大，但性能较差。这类材料种类很多，有聚乙烯醇(PVA)冷冻胶、烯氧化物载体、无孔聚烯(PS)／聚苯乙烯磺酸钠 (PNaSS)微球载体、球状纤维素单宁树脂和多孔醋酸纤球形载体等。 3.2 无机载体材料 无机载体材料具有一些有机材料不具备的优点，如稳定性好、机械强度高、对微生物无毒性，不易被微生物分解，耐酸碱，成本低，寿命长等。目前，对无机载体加以修饰，使之与酶和细胞结合的技术取得了重大突破。 氧化铝陶瓷管 SiO2 3.3 复合载体材料 复合载体材料是以有机材料和无机材料复合组成的新载体料。如磁性高分子微球，这是一种内部含有磁性金属或金属氧化物的超细粉末，从而具有磁响应性的高分子微球。 磁性高分子微球 4 固定化酶的方法 4.1 固定化酶的传统制定方法 酶的传统固定方法主要有吸附法、包埋法、共价键结合法、交联法和一些其他方法，针对不同的酶、不同的载体，需要采用不同的方法，有时还需要将几种方法联合使用。 4.1.1 吸附法 吸附法是通过吸附作用将酶吸附在炭、有机聚合物、玻璃、无机盐、金属氧化物或硅胶等材料上。该方法又分为物理吸附法和离子吸附法。 离子吸附法 4.1.2包埋法 包埋法是指酶或细胞包埋在各种载体(如聚丙烯酰胺凝胶、藻酸盐、角叉菜聚糖等)中发生聚合、沉淀或凝胶化使之固定的方法。主要分为凝胶包埋法和微胶囊包埋法。 凝胶网格 微胶囊包埋 4.1.3 结合法 结合法指选择适宜的载体，使通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定方法。包括离子键结合法和共价键结合法。在共价键结合法常用的载体有：纤维素、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、甲壳素等。 共价键结合法 4.1.3 交联法 交联法是用双功能试剂或多功能试剂进行酶分子之间的交联，使酶分子和双功能试剂或多功能试剂之间形成共价键，得到三向的交联网状结构。一般将吸附法和交联法2种方法结合起来使用。 交联法 吸附与交联 4.2 改进酶的固定化进展 传统的固定方法有许多不足之处，为了实现在较为温和的条件下进行酶的固定化，尽量减少或避免酶活力的损失，有关专家进行了大量研究，或研发新型固定方法， 或改进影响固定化因素(例如载体)，都取得了不错的效果。 4.2.1定向固定 定向固定化酶技术它解决了传统酶固定化方法中酶在任意位点与载