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- 2016-03-24 发布于贵州
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人滋养层细胞培方法的建立与HBsAg进入滋养层细胞的初步研究
人血清,及正常细胞培养液(空白对照组)继续培养.分别在12h,24h,36h,48h,
60h,72h时收集各细胞铺片,免疫组化检测细胞的感染状况。
I(O.15U/m1)联合消化法获得的人
培果经胰蛋白酵(0.25%).DNase
绒毛膜滋养层细胞,角蛋白染色阳性率超过95%,台盼蓝排斥实验检测细胞
存活率超过90%,符合后续实验要求.流式细胞仪检测结果显示培养的人绒
YRⅢ的高表达.给培养的人绒毛膜滋养层细胞
毛膜滋养层细胞表面存在Fc
加入不同的因子,正常人血清组细胞和空白对照组细胞除了随着孵育时间延
长,密度不断增加外,细胞状态不受所加因子的影响。其它各组细胞在12h、
24h时。各细胞铺片生长良好,密度适中.36h时,细胞过于致密,细胞问界
限不清,趋向死亡.48h后,细胞出现脱落现象,并卷曲死亡.用anfi-tiBs
合物组细胞和热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清和
高滴度anfi-HBs阳性血清共同孵育物组细胞出现较多l帕sAg阳性信号,热
现,其它各组细胞均未发现HBsAg阳性信号.
结论体外培养的人胎盘滋养层细胞可将HBsAg-抗HBs复合物中的
{旧sAg“摄入”胞内,而不能将单独的皿sAg“摄入”胞内.因此,我们推测,
感染HBV的母亲,其血液中的HBsAg与所产生的抗HBs形成}-lBsAg-抗衄s复
合物,复合物中抗HBs的Fc段与滋养层细胞上的FcyRⅢ相结合,通过Fc
YRⅢ介导的内化作用,将HBsAg带入滋井层细胞内,从而引起胎盘的滋养层
细胞受到感染.
:;幸(汐
关t词:绒毛膜滋养层细胞,人:2培养,体羚;流式细胞术;免疫组织化
学;HBV,宫内传播:FcYRm
2
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ofh,,mn culturemethodand
Bstahliabsent
trophoblasts
on of human
studies into
primary entrynBsag
trophoblasts
Postgraduate:WANG
Xue—Ping
Tuitors:Prof.XU
De—Zhong.
Prof.LIYuan-Gui
Instructor:眶NKe
of gedical
DepartmentEpidemiology,Foarthlilitary University。Xi’Ⅻ
Abstract
couldinfectfetus is
ai=}jBV intrauterine
throughplacentae,which
transmissionof}mv.At were afew about
present.thereonly reports
ofHBV
themechanismintrauterinetransmission.Since
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