哺乳期镧暴露对代大鼠脑组织氧化损伤及神经元凋亡的影响.pdfVIP

·中文论著摘要· 哺乳期镧暴露对子代大鼠脑组织氧化损伤 及神经元凋亡的影响 刖 置 稀土元素(rareearth 十几年来，稀土技术在我国迅速推广和应用，涉及农业、畜牧业、水产养殖、工 业和医药等多个领域，特别是稀土微肥、微饲被广泛应用于农业、畜牧业生产。 随着应用的日益广泛，越来越多的REEs进入环境，并通过食物链的作用进入人 体，REEs的环境残留、蓄积及其对人体健康的影响成为不容忽视的卫生学问题， 因此REEs的环境影响和健康效应值得深入研究。 有关稀土元素的损害效应，国内外均有一些报道：认为稀土元素可延缓生长 发育过程，引起肝、肾、心脏的病理改变，抑制免疫功能，促进细胞氧化损伤， 导致染色体畸变等。稀土元素对于中枢神经系统的危害尤其值得重视。稀土元素 可以通过血脑屏障进入脑组织，通过胎盘屏障由母体进入胎儿体内。因此，长期 摄入稀土对发育中的中枢神经系统造成的损害不容忽视，是关系到优生优育和儿 童健康的亟待解决的重要课题。 海马是高级神经中枢，是学习记忆的关键脑区。海马神经细胞的损伤对于神 经系统发育会产生严重影响。镧是最具代表性的轻稀土元素，化学性质活泼，可 与机体各种成分发生反应而诱发效应。镧也是自然界中含量较多的REEs，且在脑 中的蓄积性较强，常作为REEs神经毒性研究的代表物质。目前乃至REEs损害学习 记忆的机制尚不明确。因此研究镧的毒性研究成为了稀土元素研究的重点。 本课题采用大鼠哺乳期染镧的方法，观察不同剂量镧暴露对仔鼠脑细胞氧化 损伤及海马细胞凋亡率的影响，探讨镧的传递过程及其所致中枢神经系统毒作用 的机制、为全面评价稀土元素的安全性提供部分理论依据。 材料和方法 物室温度18．23℃，相对湿度45．55％。驯化1周后按体重随机分为4组：对照组 和低、中、高剂量组，每组6只。动物交配：雌雄大鼠以1：1同笼，次日晨于盘 底及阴道检查阴栓，查出阴栓者，母体编号称重，另笼饲养。产子后，通过自由 饮水方式对各组动物进行染毒处理。对照组：饮用蒸馏水；低剂量组：饮用含0．25 ％的LaCl3蒸馏水溶液；中剂量组；饮用含0．5％LaCl3的蒸馏水溶液；高剂量组： 饮用含1．0％LaCl3的蒸馏水溶液。连续染毒至仔鼠断乳。染毒结束后进行各种指 标测定。 1、一般指标：体重、脑组织重量并计算脑组织系数。 3、脑组织还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定二硫代双硝基苯甲酸 (DTNB)法。 4、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力测定黄嘌呤氧化酶法。 直接法。 6、细胞凋亡率的测定流式细胞仪法。 7、凋亡相关基因bel．2和bax的检测免疫组化法。 结 果 1、各组仔鼠体重与脑组织重量、脑组织系数 各染镧组与对照组比较，高剂量组体重显著低于对照组(PO．05)，高剂量 染镧组脑组织重量显著低于对照组(PO．05)。低、中高剂量染镧组脑组织系数 显著低于对照组(PO．05)。 2、脑组织脂质过氧化指标检测 脑组织中MDA水平，各染镧组均显著高于对照组(PO．01)，且随染镧剂量 的增加而显著升高，具有明显的剂量．效应关系；GSH含量，高剂量组显著低于对 SOD活力随剂量升高呈下降趋势，高剂量组显著低于对照组及低、中剂量组(P 2 剂量组与中剂量组比较显著降低(P0．05)。 3、脑组织细胞凋亡率的检测 中剂量组、高剂量组脑组织细胞凋亡率显著高于对照组、低剂量组，对照组 与低剂量组虽无显著性差异(P0．05)，但有升高趋势，实验组细胞凋亡率随氯 化镧染毒浓度的增加而显著增加；高剂量组细胞凋亡率显著高于和中剂量组。 4、海马细胞凋亡相关基因bcl．2、bax的蛋白表达情况 海马细胞bcl．2基因表达的半定量分析结果。随着染镧剂量的升高，阳性面积 百分比和积分光密度值均呈下降趋势，有明显的剂量．效应关系。中、高剂量染镧 组与对照组比较均有显著性差异(PO．01)。中、高剂量染镧组与低剂量染镧组 之间的差异有显著性(PO．01)。 海马细胞bax蛋白表达比较，随着染镧剂量的升高，反映bax蛋白表达的半 定量指标阳性面积百分比和积分光密度值均升高，有明显的剂