天然黄酮类化合对脂氧合酶介导吩噻嗪和异丙肾上腺素氧化的影响.pdfVIP

天然黄酮类化合物对脂氧合酶介导 吩噻嗪和异丙肾上腺素氧化的影响 摘要 [目的]研究天然黄酮类化合物茶多酚及其单体EGCG和EC、槲 皮素、芦丁对脂氧合酶介导吩噻嗪类化合物和异丙肾上腺素氧化反应 的影响，并初步探讨天然黄酮类化合物抑制脂氧合酶介导外源性化合 物氧化的机制，试图为脂氧合酶作为细胞色素P450介导外源性化合物 氧化代谢的替代途径提供进一步的证据。 [方法]在适宜条件下，将大豆脂氧合酶(SLO)、酶活性调节物 和反应底物、过氧化氢等加入反应体系中，用UV-VIS7501分光光度 计进行光谱扫描，记录特定波长下的吸光度值或吸光度随时间的增加 情况；用电子自旋共振波谱仪(ESR)测定反应体系中自由基生成情 况。根据不同条件下吩噻嗪类自由基或异丙肾上腺素氧化产物的生成 速度，计算酶的比活力和各调节物对脂氧合酶介导底物氧化的抑制率 和半数抑制浓度。 [结果]在H202参与下，SLO可有效介导吩噻嗪类化合物氧化生 成吩噻嗪阳离子自由基。典型的脂氧合酶抑制剂去甲二氢愈创木酸 和抗坏血酸、自由基清除剂叔丁基菌香醚(BI-tg)和丁化羟基甲苯 (BHA)、天然黄酮类化合物茶多酚及其单体EGCG和EC、槲皮素、 芦丁均可以抑制上述酶促氧化过程，并且在一定的浓度范围内，有明 显的剂量效应关系。茶多酚及其单体ECCG和EC、槲皮索、芦丁对 上述氧化反应的半数抑制浓度(IC50)均低于其它受试的脂氧合酶活 性调节物，并具有统计学意义。在H202参与下，SLO还可酶促氧化 异丙肾上腺素生成异丙肾上腺素红，典型的脂氧合酶抑制剂NDGA 和棉子酚、还原剂DTT、GSH和抗坏血酸可抑制该氧化反应的进行， 而自由基清除剂BHA、BHT和天然黄酮类化合物茶多酚及其单体 EGCG和EC、槲皮索、芦丁均对异丙肾上腺素红的生成没有影响。 [结论]茶多酚及其单体EGCG和EC、槲皮素、芦丁均可明显 抑制SLO介导吩噻嗪类化合物氧化生成相应吩噻嗪阳离子自由基的 过程，其抑制能力显著性地高于NDGA和棉子酚、还原剂DTT、GSH、 皮素、芦丁和自由基清除剂叔丁基茴香醚和丁化羟基甲苯对SLO介 导的无自由基生成的异丙肾上腺素氧化反应没有影响，提示茶多酚及 其单体EGCG和EC、槲皮素、芦丁主要是通过清除SLO介导外源性 化合物氧化过程中产生的自由基来发挥对SLO协同氧化酶活力的抑 制作用。 关键词脂氧合酶，外源性化合物，协同氧化，黄酮类化合物，吩噻 嗪，异丙肾上腺素，自由基 Il Effectofnatural flavonoidsonthe oxidationof and mediated phenothiazines isoproterenol by Abstract This isto theeffectofthenatural 【0bjeetivesl study investigate flavonoids(tea and the polyphenols，EGCG,EC，quercetinrutin)on oxidation of and mediated phenothiazinesisoproterenol by to for searchthemechanism lipoxygenase，and