多壁碳纳米管的物分布及毒性作用研究.pdf

中文摘要 多壁碳纳米管的生物分布及毒性作用研究 研究生：叶兵 指导教师：浦跃朴教授梁戈玉副教授 东南大学公共卫生学院 中文摘要 碳纳米管是由片层结构的石墨卷曲而成的中空纳米级管状结构，碳纳米管直径在零点几纳米到 几十纳米之间，长度却可以达到微米甚至毫米，正由于碳纳米管这种直径长度比，从而赋予碳纳米 管具有独特的结构和理化性质，已，“泛应用在电子器件制造、航天等领域，特别是在医学领域，碳 纳米管作为药物载体的前景更是受到研究者们的关注。由于碳纳米管的独特性质，随着科学技术的 日益进步，碳纳米管产品已经出现在很多领域。但是关于它们的生物安全性，也越来越引起人们的 关注。目前，国内外关于碳纳米管的毒性研究较少，现有报道多集中在肺脏毒性研究，数据零散且 不统一，缺乏系统性研究。本研究通过对多壁碳纳米管的生物体内分布、动物毒性、细胞毒性进行 研究，较为系统的探讨多壁碳纳米管对机体的生物学效应，同时对碳纳米管与呼吸系统典型毒物的 联合毒性进行研究。从而为碳纳米管的安全性评价提供科学依据。 一、多壁碳纳米管在小鼠体内的生物分布研究 对多壁碳纳米管进行125I标记，以尾静脉、腹腔注射和灌胃等三种途径进入健康雌性ICR小鼠 体内，分别于注射后10min、30min、lh、6h、12h和24h处死小鼠，取血、心、肝、脾、肺、肾、 脑、肌肉、骨、胃、肠、皮肤和胸腺等脏器进行125I放射性检测，计算每克组织百分注射剂量率并 进行分布分析。静脉注射染毒途径显示多肇碳纳米管在10min内可迅速分布到全身，主要聚集部位 是肺。肺组织中的多壁碳纳米管在24 min h内持续增加，每克肺组织百分注射剂量率(％lD／g)从10 时的37％ID增加剑24h的53％ID。肾组织中的多壁碳纳米管含量仅次于肺组织，多壁碳纳米管 进入体内10 h内迅速下降到 min后，每克肾组织百分注射剂营率(％ID／g)为12．07％ID。在24 2．96％ID。肝和脾脏组织中多壁碳纳米管量比较稳定，24 h时每克组织百分注射剂鼍率(％lD／g)分 低于0．5％ID。灌胃染毒途径显示多肇碳纳米管进入小鼠体内后，主要聚集在胃和小肠组织中，其他 组织中非常的少，24h后基本上从体内排除。腹腔注射染毒途径硅示多媾碳纳米管进入小鼠体内后， 迅速分布剑全身各组纵脏器，10min时肾脏分布较高，但主要在脾脏中持续集聚，24h后每克脾组 织卣分注射剂鼙率(％iD／g)从3．18％ID上升剑6．2l％ID。 二、多壁碳纳米管对小鼠的急性和亚慢性毒性作用研究 参照欧盟OECD实验指南对多壁碳纳米管进行小鼠急性和亚慢性毒性试验。急性毒性试验按照 天。急性毒性试验结果显示雌性与雄性小鼠的LD50均为550 mg／kg，其95％可信Ⅸ问分别为 88．94—2430．00和265．40-1520．00 mg／kg。亚慢性毒性试验结果显示高剂量染毒组小鼠活动减少并有嗜 睡现象，其余各剂量组小鼠无明显异常表现。 染毒期间前三周高剂量组雄性小鼠体重明显低于对照组，其余各组体重变化相似。不同剂量组雌性 小鼠在实验期间内体重变化无统计学意义。脏器系数和组织病理结果显示磷酰胆碱多壁碳纳米管主 要聚集在肝、脾和肺脏器中。50和250mg／kg染毒组小鼠的肝、脾和肺脏中有间隙炎症和轻度纤维 化改变。 10mg／kg染毒组小鼠的谷草转氨酶水平轻度升高，其它各生化指标无显著性改变。 三、多壁碳纳米管对人支气管上皮细胞的毒性作用研究 不同浓度的(0、12．5、25、50、100、200和400 lag／m1)多壁碳纳米管作用于16．HBE细胞，分 壁碳纳米管对16一HBE细胞活性、细胞凋亡、细胞周期、DNA损伤的影响。细胞结果显示，多壁