大蒜油拮抗荷瘤鼠化放疗致白细胞减少的作用研究.pdf

山东大学硕士论文 大蒜油拮抗荷瘤小鼠化放疗致白细胞减少的作用研究 研究生 李阳 导师 谢克勤教授 中文摘要 目的 种主要手段。但其选择性差，在取得治疗效果的同时，常出现不同程度的毒副 作用，即杀死癌细胞同时，对正常细胞也产生很大的影响。在各种副作用中， 骨髓抑制导致的白细胞较少症(Leukopenia)，既是最常见又是最严重的副作用 之一。在尚未发现有效治愈手段前提下，利用植物药或植物活性提取物，辅助 化疗或放疗，降低其毒副作用，特别是骨髓抑制导致的白细胞减少，免疫力降 低等并发症，提高生活质量，是肿瘤治疗的一个热点课题。大蒜油(Garlicoil，GO) 是从百合科葱属植物大蒜中提取的～种与水不相混溶的油状多组分挥发性混合 物，含有烯丙基硫化物和水溶性半胱氨酸等多类有效成分。流行病学调查和实 验研究均已证实GO有抗氧化损伤的作用，本实验室前期研究发现大蒜油能显著 减轻辐射导致的白细胞减少症。而化疗和放疗中最主要的副作用是导致白细胞 数量降低，进而导致患者免疫力低下，从而限制了其应用。因此，本研究以小 鼠肝癌细胞H22建立荷瘤小鼠模型，分别以广谱高效的环磷酰胺(CP)治疗荷瘤 小鼠作为化疗模型，和以临床常用的医用X射线照射荷瘤小鼠作为放疗模型，观 察GO是否对化疗放疗所致白细胞减少症等毒副作用起拮抗作用。 方法 1．荷瘤小鼠模型建立及分组 选择H22癌细胞株接种后6．8天的种鼠，抽取约3ml腹水(乳白色)，放入无菌 容器内，加无菌生理盐水洗涤后，以1000r／min离心5min(离心半径10cm)，弃 上清，洗两次后，收集癌细胞。用无菌生理盐水制备成2×107cells／ml的细胞悬液， 备用。用酒精消毒接部位的皮肤，每只小鼠于左腋窝皮下接种癌细胞悬液(2× 山东大学硕士论文 第一部分实验分组60只荷瘤小鼠按体质量随机分成荷瘤模型组(Model 组)、CP组、25 GO+CP组(GOI+CP组)和50GO+CP组(G02+CP mg／kg mg／kg 50 bw，GOI+CP组 组)，每组15只。隔一天开始给药，CP组腹腔注射CP m眺g 和G02+CP组，在给予CP的同时，分别用25bw和50 bw大蒜油灌胃， mg／kg mg／kg Model组和CP组用等体积玉米油灌胃，连续14d。 第二部分实验分组60只荷瘤小鼠按体质量随机分成荷瘤模型组、放疗组、 低剂量GO组(25 mg／kg)、中剂量G0组(50mg／kg)和高剂量GO组(100mg／kg)， 每组12只。隔一天开始给药，放疗组、低剂量GO组、中剂量GO组和高剂量GO 组给予500Rad剂量的一次性X射线全身照射。低剂量GO组、中剂量GO组和高剂 量GO组，在给予X射线照射的同时，分别用25 GO mg／kg、50mg／kg和100mg／kg 灌胃，模型组和放疗组用等体积玉米油灌胃，连续14d。 2．实验指标 于第14天，将各组小鼠摘眼球取血后处死，剥取完整瘤块后称重，计算抑 瘤率。同时测外周血红细胞计数、白细胞计数和血小板计数。取脾脏称重，计 算脾脏指数，同时进行病理切片，观察组织病理和脾结节计数。取骨髓进行骨 髓有核细胞计数、骨髓DNA含量、骨髓嗜多染红细胞微核率。 统计学处理数据以x=ks表示，采用SPSSl7．0对多组数据进行单因素方差分 析；各实验组与对照组两两比较采用Dunnett检验，检验水准Q=O．05。 争士甲 三日术 1．GO拮抗荷瘤小鼠化疗致白细胞减少的作用研究 1．1．对化疗荷瘤小鼠体质量的影响 实验结束时，Model组体质量有不同程度的增加，CP组体质量明显下降。大 蒜油治疗组体质量减轻不明显，但与CP组无统计学差