塞替派诱发的人气管上皮恶性转化成瘤细胞的生物学特性研究.pdfVIP

粜替派诱发的人支气管}：皮恶性转化成痛细胞的生物学特性研究 中义摘要 塞营派诱发的人支气管上皮恶性转化成瘤细胞的生物学特性研究 ， 摘 要 ＼＼癌症特别是化学致癌物引起癌症的发病机理、治疗和预防是当今医 学界关注和研究的重要课题。70年代以来，医源性致癌一词出现在 医学文献中，这当中包括了药物引发的肿瘤在内。随着新化学物质的 不断扩大，能提供的新化学药物进一步增多，因此药物致癌性问题只 益受到重视。’ 药物致癌与化学物质致癌一样是个复杂的问题涉及多因素，多 基因参与的多阶段过程。体外细胞转化基本上模拟了体内靶细胞向肿 瘤细胞的演变过程。取不同转化阶段的细胞，分别从细胞和分子水平 研究药物诱发细胞癌变的机理具有重要意义。塞替派(Thiotepa，TE) for 是临床常用的抗癌药，也是IARC(International Agency ResearchonCancer)认定的为数不多的人类药物致癌原，在临床上 具有诱发原发或继发性二次肿瘤的负面效应，因此，对代表性致癌药 物塞替派的致癌机理研究是药物致癌性研究的重要课题。 本研究在我室袁素波等已进行的塞替派诱导永生化人支气管上 immortalizedhuman bronchial 皮细胞(nontumorigeniC epithelial cell 1ine，BEAS一2B)转化、转化细胞的生物学特性和细胞周期调控 因子研究的基础上递进进行。恶性转化细胞能在裸鼠体内形成肿瘤是 确定致癌原诱发人体上皮细胞癌变的最终指标。本研究以塞替派诱导 的转化细胞(BEAS—TE)的致瘤性试验为研究起点，在细胞和分子水平 上，分别利用免疫组化，染色体G显带技术，RT—PCR及序列分析技 术进行了转化细胞的裸鼠成瘤试验、肿瘤细胞的体外培养建系、肿瘤 细胞自蜘胞增殖动力学特性、染色体畸变以及肿瘤相关基因等方面的 研究丙慨将主要研究结果报道如下： 7＼ 1． BEAS—TE(immortalized humanbronchial cell epithelial 采替派诱发的人支气管I：皮悲性转化成痫细胞的生物学特性埘究 中文摘要 transformed by 龄裸鼠，每组接种6只，雌雄各半。26周后，BEAS一2B组6只裸鼠 3只裸鼠的肿瘤直径在1cm以上。经病理组织形态，免疫组织化学 和肿瘤组织的电镜超微结构检查证实肿瘤为低分化癌肉瘤组织。肿 瘤组织经体外原代细胞培养获得3株能在体外长期传代的细胞系， humanbronchial cell 命名为：BEAS．TTa，b，C(tumorigenicepithelial transformed bythiotepa)。 的增殖动力学、细胞琼脂糖克隆形成率和细胞形态计量学的差异。 落形成率。采用自动图象分析系统对这三种细胞的形态计量学分析 核浆比依次递减。 在BEAS—TT细胞的传代过程中还进行了染色体数目的观察和核 型分析。细胞基本核型分析结果表明，三株第18代的BEAS-TT细 +M1，+M2，+M3，+M4，+M5： ·17，一22，+11，+20，+M1，+M2，+M3，+M4：BEAS-TTc：44， XY，一5，．14．15，一22， 以BEAS．TTb和BEAS-T1