姜黄素对饮水砷露小鼠肝脏损伤及对肝脏Nrf2信号通路的影响.pdfVIP

·中文论著摘要· 姜黄素对饮水砷暴露小鼠肝脏损伤及对肝脏Nrf2信号 通路的影响 目的 砷是国际癌症研究组织(IARC)确认的人类致癌物。砷在体内的代谢过程是 一种甲基化代谢反应。主要通过氧化还原和一甲基化、二甲基化过程，最终转化 为多种甲基化的砷代谢产物，随尿液排出。肝脏是砷代谢、毒性和致癌性的主要 靶器官。氧化应激是慢性砷中毒的主要作用机制之一。无机砷暴露产生活性氧群 (reactive oxygenspecies，ROS)、并且影响体内许多重要的抗氧化酶的活性和GSH 等抗氧化物的大量耗竭。为避免ROS的损害或肝脏纤维化，肝脏具有一系列复杂 的抗氧化防御系统。其中最主要的目前被认为是Nrf2信号通路。该通路最终通过 调控II相解毒酶和抗氧化酶基因的转录，包括血红素单加氧酶．1(heineoxygenase—l， oxidoreductase HO一1)、醌氧化还原酶(NAD(P)H：quinine1，NQ01)、谷胱甘肽·S-转 and ligasecatalytic，GCk (epoxidehydrolase，EH)等，能够降低肝脏对氧化应激的敏感性，从而保持肝脏功 能的稳定以及阻止肝脏疾病的发生。 姜黄素(curcumin)是从姜黄根茎中提取的一种酚类化合物，具有抗炎、抗 氧化等多种广泛的生物学作用，因此其对机体的抗氧化保护作用和机制一直受到 普遍关注。姜黄素通过多种机制发挥其保护作用，其中之一是促进细胞的核转录 因子Nrf2发生核转位，进而活化并诱导II相解毒酶和抗氧化酶，从而发挥对氧化应 激的保护作用。目前，有关姜黄素对于砷诱导的肝脏损伤的保护作用的整体动物 实验、以及姜黄素在整体动物中对肝脏Nm信号通路的影响，报道尚不多见。 综上所述，本研究拟采用小鼠整体动物实验模型，观察姜黄素干预对饮水砷 暴露小鼠肝脏损伤的保护效果、并初步探讨姜黄素对肝脏Nrf2信号通路的可能影 响。本研究试图为使用膳食化合物活化Nrf2信号途径来对抗或缓解砷诱导的慢性 损伤等的可能性和可行性等提供实验依据。 实验方法 1、实验动物及分组 选择健康昆明种雌性小鼠60只，分组情况如下t 对照组(contr01) 蒸馏水， 单纯染毒组 10 NaAs02 mg／L、50mg／L，100mg／L 200 200mgkg姜黄素干预组 mpJkg姜黄素+10mg／L、50mg／L，100 NaAs02 mg／L 600 0 mg／L，100 600mg／kg姜黄素干预组 mg／kg姜黄素+1mg／L、50 NaAs02 mg／L 2、染毒小鼠一般状况观察 3、测定血清ALT和AST活力：南京建成试剂盒 4、测定肝脏MDA含量：南京建成试剂盒 5、测定全血GSH含量及肝脏GSH活力：DTNB法 6、肝脏GSH-Px活力测定：南京建成试剂盒 7、肝脏Nrf2、H0-1和NQ01的蛋白表达水平：westernblot方 法分析 8、肝脏病理形态观察和免疫组化 9、饮水砷暴露小鼠的尿砷含量测定 实验结果 1、一般情况 所有的60只小鼠用NaAs02处理6周均存活。不同水砷浓度不同组别小鼠体重、 饮水量和肝脏脏器系数间均无明显差异。 2、姜黄素干预对饮水砷暴露小鼠肝脏损伤的影响 10 mg／L、50m