树豆酮酸A改善岛素抵抗的作用研究.pdfVIP

摘 要 实验目的 采用地塞米松诱导的肝胰岛素抵抗细胞模型、脂肪细胞胰岛素抵抗模型和肌细胞 胰岛素抵抗模型，研究树豆酮酸A(缩写CAA)调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗的作 用，并探讨其可能的作用机制。 实验方法 3T3一L1小鼠前脂肪细胞分化，油红0染色法检测不同浓度的CAA对细胞成脂分化的 成肌细胞分别诱导分化为成熟的脂肪细胞和肌细胞，采用地塞米松(DEX)诱导人肝 13、PI。K、 AKT、GLUTl、GLUT4、GSK一3 B)表达及磷酸化(p-IR13、p-AKT)水平。 实验结果 显示，3T3一L1前脂肪细胞于细胞融合1天后，PTPlBmRNA水平逐渐增加，分化诱导 剂I加入2天出现峰值：随后PTPlBmRNA水平呈下降趋势，诱导分化液换成正常培 养基后，随着细胞呈现明显的成脂样分化(胞质出现脂滴)，PTPlBmRNA水平再次上 u 2．CAA对3T3一L1前脂肪细胞增殖及分化的影响：CAA在18．75—200mol／L浓度 以及脂肪的合成，且随剂量增加而增强。在150和200umol／L浓度抑制作用显著 (PO．01)，抑制率达到78．72％和87．25％。 3．CAA对胰岛素抵抗脂肪细胞的作用：CAA(25umol／L)对正常细胞葡萄糖消耗 无显著影响(PO．05)，但明显促进地塞米松诱导的胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗 (PO．05)。与正常细胞比较，胰岛素抵抗脂肪细胞PTPlBmRNA水平没有显著性差异， 12 但蛋白水平明显增加(PO．01)，PTPlB蛋白表达增加42．6％；CAA(25mol／L)可显 mRNA 著降低胰岛素抵抗脂肪细胞PTPlBmRNA及蛋白表达水平(PO．01)，对PTPIB 及蛋白表达抑制率分别为为24．8％和72．5％。与正常细胞比较，胰岛素抵抗脂肪细胞 胰岛素信号传导通路中的相关蛋白IRS-I、IRS-2、IR B、p-IRB、ml。K表达水平明显 p—IR GSK一3 13增加了35．17％；CAA可上调胰岛素抵抗脂肪细胞IRS-1、IRS一2、IR13 t3、P—IR 及PI。K的表达(PO．01)，但对GSK一3 增加了26．99％，P一工R PI。K增加了40．74％。 1．t 4．CAA对胰岛素抵抗肝细胞的作用：CAA(40mo]／L)对正常细胞葡萄糖消耗 无显著影响(Jp0．05)，但明显促进地塞米松诱导的胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗 (PO．05)。与正常细胞比较，胰岛素抵抗肝细胞PTPIB mRNA和蛋白水平均显著增加 (PO．01)PTPlBmRNA及蛋白表达分别上调了165．96％和39．11％；CAA(40u mol／L) 可显著降低胰岛素抵抗肝细胞PTPlB mRNA 及蛋白表达抑制率分别为为41．60％和57．72％。与正常细胞比较，胰岛素抵抗肝细胞 0．01)，IR 13总蛋白水平没有明显变化，其磷酸化水平稍有下降，但与正常细胞比较 无显著性差异，IRS一2及GSK一313表达水平也无明显变化；CAA可上调胰岛素抵抗肝细 胞IRS一2、AKT、GLUTl表达及IRB磷酸化水平(PO．01)，下调GSK-31