桦褐孔菌深层培条件及其多糖化学性质的研究.pdfVIP

摘 要 桦褐孔菌(Inonotus 有一百多年的应用历史，能治疗多种疾病。自美国的Humfeld H等对蘑菇的深层发酵 进行研究，提出用发酵法来培养蘑菇的茵丝体后，研究者们纷纷用这种方法进行多种 菌类的发酵。国内外对桦褐孔菌的深层发酵研究较少，而对于深层发酵培养出的桦褐 孔菌多糖的提取分离纯化以及其化学性质方面的研究更为稀少。 本文利用桦褐孔菌菌种进行深层发酵培养。为了得到大量的菌丝体和多糖，应用 单因素试验和响应面试验相结合分别得到菌丝体和多糖的优化培养基，并通过称干重 法、DNS法、苯酚硫酸法、香草醛．冰醋酸法等测定发酵液中菌丝体含量、还原糖、 总糖、三萜类物质等发酵产物含量；通过真菌多糖的提取分离步骤，得到两种桦褐孔 菌多糖102b，103a。得出结论如下： (1)桦褐孔菌菌丝体的最佳培养条件为：玉米糖化液2．76％、可溶性淀粉1．9％、 时间为6d；最佳培养温度为28。C；培养基最佳初始pH为5；确定摇床的最佳转速为 130r／min；接种量为15％；装液量为每个250mL的三角瓶装70mL培养基。 (2)桦褐孔菌胞外多糖的最佳培养条件为：玉米糖化液2．1％、可溶性淀粉2．23％、 的接种量；装液量为每个250mL的三角瓶装70mL培养基。 (3)深层培养桦褐孔菌后，菌丝体和发酵液分离，发酵液经过浓缩、醇沉、脱蛋 G．200 白、透析、干燥等步骤，获得桦褐孔菌多糖Io。再经过DEAE．52和sephadex 的分级分离，得到两种桦褐孔菌多糖102b和103a。 (4)利用纸层析确定了桦褐孔菌多糖的单糖组成有葡萄糖、半乳糖、甘露糖以 及阿拉伯糖。红外光谱显示其具有多糖的特征吸收峰，HPLCi贝0得102b分子量为 具有长的侧链和较多的分枝。 关键词：桦褐孔菌；多糖；提取分离；响应面优化 ABSTRACT Inonotus hasbeenknownformorethanone hundredasa obliquus(Fr．)Pilat years medicinalinfolkmedicinein canel／re Russian,it di伍cultdiseases． fungus many SinceHumfeldAmericanHandotherworkersstudied cultureof submerged mushroomand forwardtoculture ofmushroom mis put mycelia by method，fungi havebeenculturedsuccessful．ButtheresearchesinInonotus arescantin obliquus this extractionand researchesof aspect；f-tLrthelTnOre，theseparation polysaccharides， whichwereobtainedfrom rare． submergedculture，are Inthis Ino