盐酸克仑特罗单隆抗体免疫检测试剂盒研制.pdfVIP

盐酸克仑特罗单克隆抗体酶联免疫检测试剂盒研制 中文摘要 中文摘要 [目的】通过盐酸克伦特罗抗原的合成和单克隆抗体的研制，建立盐酸克伦特 罗的间接酶联免疫检测方法并研制盐酸克伦特罗检测试剂盒。 [方法】 盐酸克伦特罗抗原的合成和单克隆抗体的研制：用重氮化法将盐酸克伦特罗 (CL)分子与载体蛋白偶联，分别制备免疫抗原和包被抗原；以免疫抗原免疫 Balb／c小鼠，并取其脾细胞与骨髓瘤细胞(sP2／o)融合制备杂交瘤细胞，通过酶 联免疫吸附试验(ELIsA)方法筛选能分泌盐酸克伦特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞： 筛选的杂交瘤细胞接种实验动物制备盐酸克伦特罗抗体，通过灵敏度试验以及单 抗与四环素、沙丁胺醇、肾上腺素等结构类似物交叉反应试验筛选出高灵敏度和 高特异性的CL单抗。 盐酸克伦特罗间接竞争ELISA检测试剂盒的研究：以重氮化法将盐酸克伦特 罗与卵清蛋白偶联制备包被抗原(CL．0vA)；以盐酸克伦特罗作为竞争的半抗原， 与定量的抗克伦特罗单克隆抗体反应，通过对包被抗原浓度、抗CL．McAb工作浓 度、酶标二抗的工作浓度等反应条件优化试验，建立盐酸克伦特罗间接竞争ELISA 检测方法并研制克伦特罗快速检测试剂盒；经样品加标回收试验和进口试剂盒的 比对试验，研究其可行性。 [结果] (1)通过实验分离得到3株特异性分泌盐酸克仑特罗的细胞株，编号分别为 良好的相关性。 (2)通过研究建立了盐酸克伦特罗竞争ELISA检测方法并研制了检测试剂 试剂盒(荷兰E．D)比较，阳性样品再用GC—MS确认，两者阳性符合率为96．39％。 盐酸克仑特罗单克隆抗体酶联免疫检测试剂盒研制 中文摘要 【结论】本实验制备的盐酸克仑特罗单克隆抗体具有较高的灵敏度和特异性。 由该抗体制备的盐酸克仑特罗ELISA检测试剂盒具有操作简便、快速、灵敏、特 异等优点，可满足国内外关于各种动物源性食品和饲料中盐酸克仑特罗残留限量 规定的检测要求。 【关键词】盐酸克伦特罗单克隆抗体酶联免疫吸附检测 作 者：邵景东 指导教师：傅春玲副教授 II 盐酸克仑特罗单克隆抗体酶联免疫检测试剂盒研制 英文摘要 ofMonoclonal Development AntibodyBased ImmunosorbentTestKit Assay forClenbuterol Abstract amonoclonal indirect develope 【objeetive]To antibody·Basedenzyme-linked inununosorbent kit the of of assay(ELISA)testinvolving immuno—antigen synthesis the of monoclonal toCL Clenbuterol(CL)anddevelopment CL to infoods． analyze The of of andmonoclonal