猪囊尾蚴一种蛋抗原的分子克隆.pdfVIP

中文摘要 摘 要 目的，为了从分子水平研究猪囊尾蚴的基因结构，本研究 构建了猪囊尾蚴的cDNA文库从中筛选出编码某种蛋白抗原 的基因。 r方法：用异硫氰酸胍一步法提取猪囊尾蚴总RNA，经反 转隶合成cDNA片段后，将其与I『ni_一zAPXR载体连接、包 装成噬菌体构建猪囊尾蚴cDNA文库。以兔抗猪囊尾蚴多克 隆抗体筛选cDNA文库，得到一个阳性克隆(命名为pTS)。 SK质粒中，以载体臂上的 将此阳性克隆亚克隆到pBluescript 通用引物采用双脱氧末端终止法测定插入片段的核苷酸序列， GENETYX软件分析核苷酸序列编码的氨基酸序列，并在 GeneBank中进行核苷酸与氨基酸序列同源目!检索。 结果，从cDNA文库中筛选出的基因片断，其长度为 1358bp，含有一个开放读码框，编码434个氨基酸，分子量为 5 50785Da， 7端未发现启动子，3 7端未发现poly(A)信号， 但有PolyA尾巴。开放读码框末端有由TAA组成的终止密码 子。氨基酸序列中疏水陛残基占40．09％(174／434)、亲水性 两个糖基结合位点。同源性检索表明pTS片段的部分核苷酸 序列与恶性疟原虫红细胞表面抗原(ESA)同源性达100％， 部分序列与D．melanogaster的弹性蛋白酶抑制素同源性达 97％。其编码的434个氨基酸中的3旷_423个氨基酸与人、 D．melanogaster、新杆状线虫和小鼠的Q一血影蛋白同源陛分 ±茎塑兰 一 ———————————————_———————————————————————————————一 49。,4，其中39-_405之间的氨基酸 别为49％、58％、47％汞11 与人类B—血影蛋白有30％的同源眭。} 潦鬃囊曩鼍。蛩_≮．。。 绪论l cDNA片段的核苷酸部分序列与D．melanogaster pTS 弹性蛋白酶抑制素基因的部分序列高度同源，部分序列与恶性 疟原虫红细胞表面抗原基因相关。其氨基酸序列与人、 D．melanogaster、新杆状线虫、小鼠的Q一血影蛋白有同源性， 与人B—血影蛋白同源性较低。 关键词： 猪囊尾蚴；分子克隆；cDNA文库；序列分析； 同源陛分析 英文摘要 ofOneProtein Gene TheMolecular Cloning Antigen of cellulosae cysticercus to the eellulosae order cysticercus gene object：In study in cDNA of structuremolecular level，a librarycysficewus andone was wascons劬cted cellulosae gene