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天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究.pdf

畜牧兽医学报2008,39(6):726—732 et Acta耽terinariaZc,otechnicaSinica 天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的 建立与生物学特性研究 冯若飞1,马忠仁1,关伟军2,李明生1,乔自林1,冯玉萍1,周雪雁 (1.西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,兰州730030; 2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193) 摘 要:采集天祝白牦牛胚胎肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法继代培养和 细胞纯化,扩增至F。代后冷冻保存,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸 h;染色 脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示,原代和传代细胞生长形态良好,群体倍增时间为27.2 体2n=60;二倍体为74%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,LDH。浓度较高,活性较强;外源质粒 在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测星阴性。表明本研究已成功建立天祝白牦牛肾组织 成纤维细胞系,该细胞系的建立,使天祝白牦牛这一国家重要种质资源在细胞水平上得以保存,也为基因组文库和 体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。 关键词:天祝白牦牛;肾组织;成纤维细胞系;生物学特性 中图分类号:$823.8+5.2 文献标识码:A 文章编号:0366-6964(2008)06-0726—07 EstablishmentandCharacteristicsofTianzhuWhiteYaks Fibroblast KidneyExplant FENGRuo-feil,MA un2,LI Zhong—renl,GUANWei—j Ming—shen91, Zi—linl,FENG QIAO Yu-pin91,ZHOUXue—yanl (1.The and National KeyBio—engineeringTechnologyLaboratoryof Nationality Commission,NorthwestNationalities,Lanzhou730030,China; for University 2.1nsituteAnimalScience,Chinese of Academyof 100193,China) AgriculturalSciences,Beijing with andthensub— Abstract:TheTianzhuWhite wascultured yakskidneyexplant trypsinization and cultured.Observationson

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