温病湿热证湿重热与热重于湿模型制作的初步研究.pdf

中文摘要 目的 本实验以中医经典理论为依据，在使用温下、寒下药物制作中气虚实 大鼠模型的基础上，结合环境、饮食等多种因素，制作湿重于热与热重于湿 大鼠模型，并用清热化湿方加减分别对两模型大鼠进行干预，观察模型大 鼠治疗前后体温、饮食量、饮水量、二便、精神，活动量、毛色等宏观指 标的变化，运用放免及免疫组化法检测大鼠肿瘤坏死因子一仅(TNF-仅)、 白介素-1D(IL-1D)、核因子KB(NF-K B)，进行对比分析，从而探讨 湿热证的部分特性及湿重于热与热重于湿模型的制作方法，为实验的深入 研究及临床实践提供依据。 方法 采用多因素“中药灌服+高脂饮食+高温高湿环境+大肠杆菌竹复合造 模法制作湿热证模型。设立正常对照组(A)、湿重于热模型组(B)、湿重 常温湿度环境下，普通混合饲料喂养29天。②B、C，D、E：在正常温湿 度环境下，用高脂饲料喂养二周，其间B、c组第一周内灌服小承气汤(每 附子汤(每次灌胃给药29／ml／2OOg。每日二次，共7天)。第三周，再放 3-1 相对湿度75％)，每天造模时间(上午8-12时，下午17时)，放入人 一次(剂量同前)，继续观察3天。③c、E：于第一次灌服大肠杆菌后， 灌服相应中药水煎液进行反证。注意观察大鼠的体温、饮食量、饮水量、 二便、精神、活动量、毛色等的变化。第30天处死大鼠，在光镜下观察 大鼠肝组织的病理切片，用放免及免疫组化法检测大鼠血清和肝组织的 TNF一0【、IL一1 p、NF-1cB的水平。数据均采用SPSSl3．0软件包进行单因 有统计学意义。 结果 正常组大鼠症状及体征无明显变化，两模型组大鼠均出现体温升高、 饮水量及饮食量均较正常组减少、倦怠嗜卧、尿黄浊、大便稀溏、毛色 暗黄无光泽。灌服大肠杆菌后，湿重于热模型组(简称湿偏重模型组，以下 同)与热重于湿模型组(简称热偏重模型组，以下同)比较，热偏重模型 组体温升高较快、纳食较少、饮水量较多、大便较干结、小便黄浊且较 烦躁等，两治疗组大鼠症状、体征均较模型组轻，且恢复较快，热偏重治 疗组恢复较湿偏重治疗组快。 各模型组大鼠血清及肝组织TNF一0【、IL-ID、NF-1c B水平显著升高， 显著性差异(P0．05)。治疗组大鼠TNF-0【、IL-ID、NF-1c B水平均较 模型组显著性降低(P0．05)，与正常组比较无显著性差异，两治疗组 之间比较无显著性差异(Po．05)。电镜下肝组织切片：两模型组有肝 小叶均受损，中央带出现肝细胞脂肪变，门管区有炎症细胞浸润，说明湿 热模型有炎症反应。热偏重模型组比湿偏重模型组的脂变肝细胞多，且炎 症细胞较多。两治疗组肝小叶受损范围缩小，部分动物肝小叶周边带完 好的细胞增多，胞质着色较深，嗜碱质较多，两者比较无明显差异。 结论 模型组大鼠通过温下或寒下药物干预形成两种不同的中气虚实模型， 在感染大肠杆菌后，两模型组大鼠体温均升高，且热偏重模型组体温较湿 偏重模型组高，经中药干预后，热偏重治疗组比湿偏重治疗组体温恢复的 快，说明中气虚实对湿重于热与热重于湿模型的形成有影响，两模型组大 鼠的症状体征均基本符合温病湿重于热与热重于湿证的特点。 模型组TNF—O【、IL—ID、NF-lc B水平与正常组比较有非常显著性差异， 其病理生理效应，能从免疫学方面很好地诠释湿热病证的发病规律及临床 表现。其中TNF-0【、IL-Ip、NF-KB水平在两模型组之间比较有显著性差 异，说明湿热证两模型组有湿重于热与热重于湿的不同。 清热化湿方加减可明显改善湿热证模型大鼠的症状体征，并使两模型 组免疫指标及核因子NF-KB恢复正常，说明清热化湿方加减对两模型组具 有较好的干预抑制作用，中止炎症介质的转录，限制急性炎症反应，具有 较好的清热祛湿效果。 总之，从以上模型体征、指标、病理切片以及清热化湿方加减的干预 等方面，可部分说明湿