不同中医治法对缺血再灌注大鼠脑组织能量代谢及水肿的影响.pdfVIP

不同中医治法对脑缺血再灌注大鼠脑组织能量代谢及水肿的影响 中文摘要 目的：本实验研究以缺血性中风最常见的临床证型为依据，选择相应的三种不 同治法及其代表方药，作用于局灶性脑缺血再灌注大鼠模型；通过对脑组织SDH、 + + Na -K -ATPase、CK-BB、AQP-4 进行检测分析，动态比较三种中医治法及其代表方药 对脑缺血再灌注三个不同时间点脑组织能量代谢及水肿的影响，以期寻求缺血性中 风急性期不同时间点的最佳中医治法，为临床上缺血性中风的中医药的辨证论治提 供科学实验依据。 方法：健康Wistar 大鼠 240 只，雌雄各半，随机分为假手术组、模型组、益 气活血组、潜阳熄风组和化痰通腑组，每组48 只，三个不同时间点各16 只。采用 线栓阻塞大鼠大脑中动脉法制作局灶性脑缺血再灌注模型，分别观察益气活血法、 潜阳熄风法、化痰通腑法三种中医治法对脑缺血2h 再灌注24h、48h 和72h 三个时 间点的疗效。采用密度离心及差速离心法提取脑组织线粒体用于SDH 活性测定，采 用化学比色法测定脑组织匀浆Na+ + -K -ATPase、CK-BB 活性。脑组织AQP-4 的检测采 用免疫组织化学染色法，采用南京捷达801系列形态学图像分析系统分析统计AQP-4 表达的阳性面积和平均光密度。数据采用方差分析，两组间比较用t 检验。 结果：⑴在缺血 2h 再灌注 24h、48h、72h，模型组检测的脑组织 SDH 、 + + Na -K -ATPase 活性明显降低，CK-BB 活性明显升高，AQP-4 表达明显增多，符合脑 缺血再灌注损伤的病理变化，且与假手术组比较有显著性意义。⑵在缺血 2h 再灌 + + 注24h：各治疗组与模型组比较，检测的各项指标(SDH、Na -K -ATPase、CK-BB、AQP-4) 均有显著性差异；各治疗组组间比较提示，化痰通腑组在升高SDH 活性及减少AQP-4 表达方面，优于益气活血组和潜阳熄风组；潜阳熄风组在升高 Na+ + -K -ATPase 和降 低CK-BB 活性方面，优于益气活血组和化痰通腑组。⑶在缺血2h 再灌注48h：各治 疗组与模型组比较，检测的各项指标均有显著性差异；各治疗组组间比较，益气活 + + 血组在升高 Na -K -ATPase 活性和减少AQP-4 的表达方面，优于化痰通腑组和潜阳 熄风组。⑷在缺血2h 再灌注72h：各治疗组与模型组比较，检测的各项指标均有显 + + 著性差异；各治疗组组间比较，益气活血组在升高 Na -K -ATPase 及降低CK-BB 活 性、减少AQP-4 的表达方面，优于潜阳熄风组和化痰通腑组。 结论：(1)本实验检测的各项指标的变化符合脑缺血损伤的病理生理变化规律， i 不同中医治法对脑缺血再灌注大鼠脑组织能量代谢及水肿的影响 揭示脑缺血损伤是一个动态多环节的病理反应过程，中医药能够从多靶点、多途径 发挥治疗效用。(2)各中医治法的最佳作用时间位点和环节为：潜阳熄风法，在缺 血2h 再灌注24h，升高Na+ + -K -ATPase 和降低CK-BB 活性方面最为显著。化痰通腑 法，在缺血2h 再灌注24h，升高SDH 活性及减少AQP-4 的表达方面最为显著。益气 + + 活血法，在缺血2h 再灌注48h、72h，升高Na -K -ATPase 及减少AQP-4 的表达方面 最为显著；同时，在缺血2h 再灌注72h，降低CK-BB 活性方面最为显著。 (3) 三 种中医治法均能通过调节相关酶活性及蛋白质表达等干预机制改善脑组织能量代 谢