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2014—2015学年《学案设计》高中生物人教版选修3【配套课件】:12 基因工程的基本操作程序 课件2.ppt
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2.将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。
目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。结合图1、图2、图3,结合教材内容完成下列思考。
(1)结合下图理解农杆菌转化法的过程:
(2)将目的基因导入受体细胞的方法见下表。
生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 法 技术 法
Ca2+处理
受体细胞 转化过程 将目的基因插入Ti质粒的上→农杆菌→导入植物细胞→融合到受体细胞的→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2+处理细胞→细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收
小贴士 农杆菌转化法中有二次拼接和二次导入。第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒上T-DNA的中间部位,第二次拼接?非人工操作?指被插入目的基因的T-DNA被拼接到受体细胞的染色体DNA上;第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌,第二次导入?非人工操作?是指含目的基因的T-DNA进入受体细胞。
【归纳提炼】
【活学活用】
2.科学家通过基因工程的方法,将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内,并成功实现了表达,从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如图所示,请分析回答:
(1)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA_____________的特点。
(2)Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程,在基因工程中称为______________。
(3)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种,该题中涉及的是______________。
解析 (1)Ti质粒的最大优点是能将目的基因导入受体细胞的染色体DNA中,从而使目的基因在棉花体内稳定维持和表达。
(2)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。
(3)将目的基因导入植物细胞方法很多,以农杆菌中的Ti质粒为目的基因载体的称为农杆菌转化法。
答案 (1)可转移至受体细胞并且融合到受体细胞染色体DNA上
(2)转化
(3)农杆菌转化法
探究点三 目的基因的检测与鉴定
目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作,也是检查基因工程是否做成功的一步。结合下述材料,完成探究。
1.目的基因的检测
(1)方法
从图中分析可得检测目的基因的方法为杂交技术,其原理是指采用一定的技术手段,将两种生物的DNA分子的单链放在一起,如果这两个单链具有互补的碱基序列,那么,互补的碱基序列就会结合在一起,形成;若
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