养殖刺参（apstichopus japonicus）苗期细菌性疾病及其病原学初步研究.pdfVIP

养殖刺参(Apostiehopus japonicus)苗期细菌性疾病及其病原学初步研究 细菌性疾病及其病原学初步研究 摘 要 近年来，山东和辽宁半岛的养殖刺参(Apostichopusjaponicus)不断发生大 规模的死亡，给刺参养殖业造成了巨大的经济损失。由于参苗对疾病的抵抗力弱、 防病措施不够完善等原因，苗期疾病的发生率、传染率、死亡率极高，疾病的发 生给苗期生产带来了极其不利的影响。为了尽快查清引起刺参发病的原因，进而 找到防治疾病的方法和措施，笔者经过两年的时间(2004—2005年)对山东和辽宁 两省沿海地区养殖刺参的苗期病害进行了流行病学调查和病原学研究。结果发 现，刺参幼体“烂胃病”和“化板症”是目前养殖刺参苗期危害最为严重的两种细 菌性疾病。本文主要对“烂胃病”和“化板症”这两种疾病进行了病原学的研究。 参苗样品收集于山东、辽宁等地的多家刺参育苗场。采集病样的同时，测量 有关水质指标、总结发病症状和发生情况。烂胃病多发生于5～7月份的中耳和 大耳幼体时期，死亡率高达70—90％。发病症状表现为：幼体胃壁增厚、粗糙， 继而从正常的充盈梨形逐步萎缩变小、变形，严重时整个胃壁发生糜烂和体壁溃 烂，最终导致苗体死亡。被感染幼体胃中观察到有大量的短杆状细菌，运动活跃。 患病幼体的摄食能力明显下降或不摄食，生长和发育迟缓，形态、大小不齐，从 耳状幼体到樽形幼体的变态率降低。“化板症”在山东、辽宁及河北的沿海地区 均有发现，且发病率有逐年升高之势，患“化板症”初期，幼体收缩变短，活力 下降，随着病情的加重逐渐失去附着能力，掉落池底，整个身体自溶解体，在发 病池的池底往往可发现许多刺参骨片。调查发现高温或幼体培育密度高时则更容 易发病，严重时每批幼体的死亡率常达loo％。 从患病样品中共分离了八株优势细菌。研究路线为：首先取患病的参苗制作 水浸片，在显微镜下观察组织病变和微生物的存在情况，组织病理学初步确认病 养殖§U参(Apostichopua japonicus)苗期绍菌性疾病及其病原学初步研究 原；然后使用TSB、TCBS固体培养基分别分离病灶部位的细菌病原，优势细菌 经分离纯化后进行人工回接感染试验，最后，对该致病细菌进行形态学观察和分 类鉴定，具体方法包括细菌革兰氏染色、负染后电镜观察常规生理生化试验、16 SrRNA基因同源性分析等。 ‘ ● ●- 病原菌的鉴定结果表明：苗期幼体“烂胃病”和“化板症”致病菌均存在病原多 样性，弧菌是海参育苗期间的主要病原。“烂胃病”的三株主要致病菌分别被鉴定 为灿烂弧菌(W6r缸splendidus)，交替单胞菌属(Alteromonas sp．)，假交替单胞 菌(Pseudoalferomonas sp．)。“化板症”的五株致病菌中被选择鉴定的三株有两 株属于弧菌属(Vibrio sp．)，另外一株是w6r妇lentus。 此外，本文还调查了刺参养殖系统中病原菌的来源，并对其可能的传播途径 做了相关分析。在所调查的发病养殖场中，细菌学检测结果发现，投喂的鼠尾藻 饵料以及幼体附着板上附着物的优势细菌总与引起相应疾病的致病菌相一致，因 此推测这两者是病原菌的来源。 关键词：海水养殖：刺参；育苗；烂胃病；化扳症；细菌病；16SrRNA 养殖刺参(Apostlehopus j氇oongcus)苗期细菌性疾病及其病原学初步研究 嘞伽仃硷major Abstract Massmortalitiesofculturedseacucumber hadoccurred Apostichopusjaponicus