叶酸靶向青霉素酰化酶的实验研究.pdf

叶艘靶向青谭索G酰化酶的实验研究 中文摘要 中文摘要 目的：探讨叶酸一青霉素G酰化酶偶联物(F．PGA)是否对叶酸受体阳性细胞 及实体肿瘤具有靶向作用，以及对该酶在体内的药代动力学进行研究，为进一步 的叶酸靶向酶联合前药治疗(FDEPT)奠定基础。 和纸层析法鉴定放化纯度，用三氯醋酸(TCA)沉淀法行体外稳定性监测，并用 对二甲氨基苯甲醛(PDAB)法测定酶活力。(2)用共聚焦显微镜观察叶酸受体阳 性的宫颈癌HeLa细胞株和卵巢癌SKOV3细胞株以及叶酸受体阴性的肺癌A549 细胞株摄取F．PGA或叶酸(F．A)随时间变化的情况；并用放射配体结合分析法， F-A和125I(给荷SKOV3肿瘤的裸鼠 射125I．F．PGA、125I-PGA、125I-F．PGA+10mg 像结束后解剖，对各脏器进行称重及测量放射性计数。计算肿瘤／健侧肌肉(T／M) 和肿瘤／非肿瘤组织(T／NT)的放射性计数比值等。(4)用同位素示踪法研究 参数(采用DASI．0软件包)和各脏器的每克组织的百分注入剂量(％ID／g)。 外稳定性较好，且叶酸偶联和”5I标记对酶的活性损伤都较小。(2)F-PGA或F．A 可被HeLa和SKOV3细胞摄取，而不能被A549细胞摄取，且这种选择性的摄取 并内化，且呈时间、温度和浓度的依赖性及饱和性，还能被叶酸所竞争抑制，而 0．25 体参与内化和循环过程，使膜上有效受体结合位点数增加一倍。(3)注射“5I-F—PGA 组的SPECT显像，可见肿瘤部位有明显的放射性浓聚影，其T／M值．时间曲线明 叶酸靶向青霉素G酰化酶的实验研究 中文摘要 显高于其余各组的T／M值一时间曲线，用统计学分析亦有显著差异(P0．05)。24h 织中清除较快，且主要通过l肾脏排泄。 结论：F．PGA通过与叶酸受体结合并内吞途径，对叶酸受体阳性的细胞和实 体肿瘤均具有良好的靶向作用，并有较好的药代动力学性质，可望用于叶酸靶向 治疗。 关键词：叶酸；叶酸受体；青霉素G酰化酶；靶向作用：FDEPT 作 者：杨科亚 指导教师：范我教授 II 叶酸靶向青霉素G酰化酶的实验研究 英文摘要 The of StudyFolate—Targeted Experimental GAmidase Penicillin Abstract whetherthere’re effectsof G Objective：toexplore targeting folate-penicillin cellsandsolid to amidase folate tumors，and conjugate(F-PGA)onreceptorpositive its invivo．Thesedatawillbe to investigatepharmacokineticparameters helpful establishabaseforfurtherfolate—directed